USO DE BARCODING DNA PARA IDENTIFICAÇÃO DE ESTÁGIOS IMATUROS DE DÍPTEROS DE IMPORTÂNCIA FORENSE
A Entomologia Forense emprega o uso de insetos encontrados em cadáveres em investigações criminais. Entretanto, a identificação exata dos espécimes é essencial, mas muito difícil de ser efetuada em estágios imaturos. A utilização do DNA barcoding para identificação desses indivíduos torna-se de grande aplicabilidade, a fim de identificar dípteros de interesse forense como os da família Calliphoridae. Com a execução do presente trabalho objetivou-se identificar estágios imaturos de dípteros de importância forense da família Calliphoridae, utilizando a ferramenta Barcoding DNA. Para isso, foram utilizadas larvas (estágios 1o, 2o, 3o), obtidas em carcaças de Sus scrofa em decomposição e identificadas morfologicamente para separação de espécimes da família Calliphoridae. As larvas foram submetidas à extração de DNA com protocolo pré-estabelecido. O produto da extração de DNA foi analisado por eletroforese; (quanto a qualidade e quantidade). As amostras de DNA consideradas de boa qualidade foram submetidas à PCR para a amplificação da região do gene citocromo oxidase I (COI) e avaliadas por eletroforese. As amostras amplificadas foram preparadas e enviadas para sequenciamento e os sequenciados obtidos foram confrontados com o banco de dados BLAST N (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/) para determinação das espécies de larvas. Na identificação morfológica foram identificadas duas espécies predominantes, com as mesmas foi possível obter sucesso na padronização da amplificação do COI. A comparação do produto de sequenciamento resultou na identificação das espécies Chrysomya albiceps e Hemilucilia segmentaria, ambas com identidade de 100% com as sequências depositadas no banco de dados com os seguintes acessos KX161558.1 e JQ246667.1, respectivamente. As espécies identificadas são estão de acordo com o esperado, pois são as espécies mais encontradas em processo de decomposição de cadáveres. Sendo assim, o DNA Barcoding pode ser aplicado na identificação de estágios imaturos e fragmentos de insetos coletados junto às investigações criminais.
USO DE BARCODING DNA PARA IDENTIFICAÇÃO DE ESTÁGIOS IMATUROS DE DÍPTEROS DE IMPORTÂNCIA FORENSE
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DOI: 10.22533/at.ed.4702003086
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Palavras-chave: Calliphoridae, citocromo oxidase I, Entomologia Forense
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Keywords: Calliphoridae, cytochrome oxidase I, Forensic Entomology
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Abstract:
Forensic Entomology employs the use of insects found on corpses in criminal investigations. However, accurate identification of specimens is essential, but very difficult to perform in immature stages. The use of DNA barcoding to identify these individuals is highly applicable in order to identify diptera of forensic interest such as those of the family Calliphoridae. With the execution of this work, the objective was to identify immature stages of diptera of forensic importance of the Calliphoridae family, using the Barcoding DNA tool. For this, larvae (stages 1, 2, 3) were used, obtained in decaying Sus scrofa carcasses and morphologically identified for the separation of specimens of the Calliphoridae family. The larvae were submitted to DNA extraction with a pre-established protocol. The product of DNA extraction was analyzed by electrophoresis; (regarding quality and quantity). DNA samples considered to be of good quality were submitted to PCR to amplify the region of the cytochrome oxidase I (COI) gene and evaluated by electrophoresis. The amplified samples were prepared and sent for sequencing and those obtained were compared with the BLAST N database (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/) to determine the larvae species. In the morphological identification, two predominant species were identified, with which it was possible to obtain success in the standardization of the amplification of the COI. The comparison of the sequencing product resulted in the identification of the species Chrysomya albiceps and Hemilucilia segmentaria, both with 100% identity with the sequences deposited in the database with the following accessions KX161558.1 and JQ246667.1, respectively. The identified species are in accordance with the expected, as they are the most found species in the process of decomposition of corpses. Thus, DNA Barcoding can be applied to identify immature stages and fragments of insects collected from criminal investigations.
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Número de páginas: 12
- Carina Elisei de Oliveira
- Geiza Thaiz Dominguez Monje
- Daniela Lopes da Cunha
- Rafael Rodrigues de Oliveira
- Keren Rappuk Martins Shirano
- Beatriz Rosa de Oliveira
