USE OF LINEAR EQUATIONS FOR DETERMINATION OF APPARENT KINETIC PARAMETERS IN CELLULOLYTIC MEDIUM WITH Trichoderma virens
A seleção de micro-organismos com potencial de desconstrução de celulose para obtenção de açúcares fermentáveis tem sido o foco de pesquisas com intuito de obter linhagens com potencial tecnológico. O cultivo micelial submerso é uma técnica que permite uma resposta rápida sobre a linhagem de interesse. A determinação dos parâmetros cinéticos aparentes KM e Vmax é essencial para avaliar inicialmente a afinidade da enzima pelo substrato e a taxa máxima de formação do produto. Neste sentido, o cultivo do microorganismo foi realizado em frascos cônicos com agitação orbitalar, onde foi inoculado o micélio de Trichoderma virens isolado de xilófagos marinhos. Para a determinação de KM e Vmax, utilizou-se a cultivo líquido como agente enzimático. Os valores de KM e Vmax foram estimados pelos métodos de Lineweaver-Burk, Hanes, EadieHofstee e Carvalho. Observou-se que os modelos de Hanes e Carvalho foram os que apresentaram valores de KM mais próximos entre si, e os valores de KM e Vmax para o Lineweaver-Burk ficaram mais distantes dos outros modelos. No entanto, foi observado que o coeficiente de determinação de Lineweaver-Burk apresentou um melhor ajuste.
USE OF LINEAR EQUATIONS FOR DETERMINATION OF APPARENT KINETIC PARAMETERS IN CELLULOLYTIC MEDIUM WITH Trichoderma virens
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Palavras-chave: Cultivo submerso, constante de Michaelis, Trichoderma.
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Keywords: Submerged culture, Michaelis constant, Trichoderma.
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Abstract:
The selection of microorganisms with the potential of deconstruction of cellulose to obtain fermentable sugars has been the subject of research to obtain lineages with technological potential. The Submerged mycelial culture is a technique that allows a quick response on the lineage of interest. The determination of the apparent kinetic parameters KM and Vmax is essential to evaluate initially the enzyme’s affinity for the substrate and the maximum rate of product formation. In this sense, the cultivation of the microorganism was performed in conical flasks with orbital agitation where mycelium of Trichoderma virens isolated from marine xylophagous was inoculated. For the determination of KM and Vmax the liquid culture was used as the enzymatic agent. The values of KM and Vmax were estimated by the methods of Lineweaver-Burk, Hanes, Eadie-Hofstee and Carvalho. It was observed that the models of Hanes and Carvalho were the ones who presented values of KM closer to each other, and the values of KM and Vmax for LineweaverBurk became more away from others models. It was noted, however, that the coefficient of determination for Lineweaver-Burk showed a higher quality adjustment.
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Número de páginas: 15
- NELSON ROSA FERREIRA
