PLASMÍDIOS CONJUGATIVOS ISOLADOS DO ENTEROPATÓGENO Shigella sonnei CODIFICAM SUBSTÂNCIA(S) ANTAGONISTA(S) E RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA
Shigella, um enteropatógeno invasivo, é responsável pela disenteria bacilar ou shigelose, doença diarreica grave que acomete, principalmente, crianças de países subdesenvolvidos. A bactéria expressa diversos fatores de virulência, inclusive, substâncias antagonistas e resistência aos antimicrobianos. Estas substâncias são codificadas, frequentemente, por genes plasmidiais, que podem ser transferidos por processos de recombinação, como conjugação bacteriana. O presente estudo foi realizado com o objetivo de determinar se a resistência aos antimicrobianos e a(s) substância(s) antagonista(s) sintetizadas por Shigella sonnei SS9 são codificadas por genes plasmidiais. Como reveladora da expressão antagonista e receptora dos plasmídios, foram empregadas as amostras S. sonnei SS12 e Escherichia coli ATCC 25922, respectivamente. Para o ensaio de conjugação SS9 e E. coli foram avaliadas quanto aos seus perfis de suscetibilidade a antimicrobianos. Após seleção do antimicrobiano, SS9 e E. coli foram cultivadas separadamente, as culturas ajustadas em escala McFarland 0,5 e diluídas 1:50. Uma alíquota de cada amostra foi adicionada a um mesmo tubo e o material foi incubado. Em intervalos de tempos pré-determinados, alíquotas foram cultivadas em MacConkey Agar com e sem antimicrobiano. Colônias lac+ foram avaliadas quanto à expressão de antagonismo. Colônias positivas foram submetidas a extração plasmidial e análise por eletroforese. Após o cultivo de uma amostra transconjugante, o material foi centrifugado e o sobrenadante analisado pelo ensaio antagonista. Análise da curva de crescimento do transconjugante com síntese de substância(s) bioativa(s) também foi realizada. Os resultados demostram que a amostra transconjugante passou a albergar plasmídios conjugativos com presença de genes que codificam resistência aos antimicrobianos ampicilina e trimetropima além da produção de substância(s) antagonista(s). Comprovando a presença de fatores de virulência, que podem ser transferidos por conjugação, a partir do enteropatógeno S. sonnei, que foi reconhecido pela Organização Mundial de Saúde como um dos doze patógenos que necessitam, com urgência, do desenvolvimento de novos fármacos.
PLASMÍDIOS CONJUGATIVOS ISOLADOS DO ENTEROPATÓGENO Shigella sonnei CODIFICAM SUBSTÂNCIA(S) ANTAGONISTA(S) E RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA
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DOI: 10.22533/at.ed.4402229091
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Palavras-chave: Shigella sonnei, substância antagonista, enteropatógenos, conjugação bacteriana, resistência antimicrobiana.
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Keywords: Shigella sonnei, antagonist substance, enteropathogens, bacterial conjugation, antimicrobial resistence.
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Abstract:
Shigella, an invasive enteropathogen, is responsible for bacillary dysentery or shigellosis, a severe diarrheal disease that mainly affects children in underdeveloped countries. The bacterium expresses several virulence factors, including antagonistic substances and antimicrobial resistance. These substances are often encoded by plasmid genes, which can be transferred by recombination processes, such as bacterial conjugation. The present study was carried out to determine whether antimicrobial resistance and antagonist substance(s) synthesized by S. sonnei SS9 are encoded by plasmid genes. As a developer of plasmid antagonist and receptor expression, samples S. sonnei SS12 and E. coli ATCC 25922, respectively, were used. For the SS9 and E. coli conjugation assay they were evaluated for their antimicrobial susceptibility profiles. After antimicrobial selection, SS9 and E. coli were grown, separately, cultures adjusted to McFarland 0.5 scale and diluted 1:50. An aliquot of each sample was added to the same tube and the material was incubated. At predetermined time intervals, aliquots were cultured on MacConkey Agar with and without antimicrobial. Lac+ colonies were evaluated for antagonism expression. Positive colonies were subjected to plasmid extraction and electrophoresis analysis. After culturing a transconjugant sample, the material was centrifuged and the supernatant analyzed by the antagonist assay. Growth curve analysis of the transconjugant with synthesis of bioactive substance(s) was also performed. The results show that the transconjugant sample started to harbor conjugative plasmids with the presence of genes that encode resistance to the antimicrobials ampicillin and trimethopine, in addition to the production of antagonist substance(s). Proving the presence of virulence factors, which can be transferred by conjugation, from the enteropathogen S. sonnei, which was recognized by the World Health Organization as one of the twelve pathogens that, urgently, need the development of new drugs
- Jaqueline Silvana Moreira
- Jamil Silvano de Oliveira
- Desielle de Matos Clementino
- Paula Prazeres Magalhães
- Luiz de Macêdo Farias
