PESQUISA, EXTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO PARCIAL DE SUBSTANCIA ANTAGONISTA TIPO BACTERIOCINA PRODUZIDA POR Fusobacterium necrophorum
Fusobacterium necrophorum é um bacilo anaeróbio Gram-negativo, da microbiota anfibiôntica animal, incluindo o ser humano, e está associado a enfermidades, em sítios diversos, como a Síndrome de Lemierre. Considerando a relevância clínica deste microrganismo, avaliou-se a produção, in vitro, de substância antagonista por F. necrophorum ATCC 25286 contra 14 amostras de referência que integram a microbiota oral humana. As espécies que exibiram maior sensibilidade à substância antagonista foram Peptostreptococcus anaerobius, Porphyromonas gingivalis, F. nucleatum Streptococcus mutans e Prevotella intermedia, sendo o fenômeno melhor evidenciado em Brain Heart Infusion Ágar suplementado com extrato de levedura e glicose em pHs 6,0 e 7.0. Mostrou-se que a habilidade antagonista não estava relacionada à produção de ácidos, bacteriófagos, peróxido de hidrogênio ou ao clorofórmio residual. As frações proteicas precipitadas pelo sulfato de amônio que mostraram atividade foram as extra e intracelulares, precipitadas a 50 e 80%. Observou-se que C50 e C80 mantiveram sua atividade nos valores de pH 7,0 a 9,0 e 5,0 a 9,0, respectivamente. Em relação ao tratamento térmico, C50 mostrou-se mais instável que C80. Após o tratamento com proteases, os extratos ativos perderam atividade, confirmando a natureza protéica da substância. A massa molecular da substância foi estimado entre 37 e 50 kDa, conforme atividade “in situ” contra P. anaerobius. Esse é o primeiro relato de atividade antagonista de F. necrophorum e a relação de heteroantagonismo observada evidencia um possível papel ecológico da substância no ecossistema oral, podendo favorecer bactérias indígenas com potencial patogênico, como o F. necrophorum, motivo pelo qual se considera este fenômeno relacionado à virulência.
PESQUISA, EXTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO PARCIAL DE SUBSTANCIA ANTAGONISTA TIPO BACTERIOCINA PRODUZIDA POR Fusobacterium necrophorum
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DOI: 10.22533/at.ed.2992311074
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Palavras-chave: Anaeróbios, Fusobacterium necrophorum, substância antagonista, substância tipo bacteriocina.
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Keywords: : Anaerobes, Fusobacterium necrophorum, antagonistic substance, bacteriocin-like
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Abstract:
Fusobacterium necrophorum is a Gram-negative anaerobic bacillus, of microbiota, including human beings and is associated to diseases, such as the Lemierre Syndrome. Considering the clinical relevance of this microorganism production, in vitro, of antagonistic substances for F. necrophorum ATCC 25286 was evaluated against 14 reference strains that integrate oral human microbiota. The species that had shown greater sensitivity to the antagonistic substance had been Peptostreptococcus anaerobius, Porphyromonas gingivalis, F. nucleatum Streptococcus mutans and Prevotella intermedia,, being the phenomenon better evidenced on the Brain Heart Infusion Agar supplemented with yeast extract and glucose at pHs 6,0 and 7,0. The antagonistic ability was not related to the production of acid, bacteriophages, peroxide of hydrogen or to residual chloroform. The protein fractions precipitates by ammonium sulphate that had shown activity had been the extra and intracellular precipitates at 50 and 80%. It was observed that C50 and C80 had kept its activity in the pH values between 7,0 and 9,0 and 5,0 the 9,0 respectively. At the thermal treatment, C50 revealed unstable than C80. After the protease treatment, active extracts had lost activity, confirming the protein nature of the substance. The molecular mass of the substance was approximately between 37 and 50 kDa evaluated as activity "in situ" against P. anaerobius. This is the first report of antagonistic activity of F. necrophorum and the relationship of heteroantagonism evidence a possible ecological role of the substance in the oral ecosystem, being able to favor bacteria with pathogenic potential, such as F. necrophorum, reason for which if it considers this phenomenon related to the virulence.
- Jaqueline Silvana Moreira
- Carolina Araújo Vieira
- Maria Auxiliadora Roque de Carvalho
- Carolina Nicolai Valeff
- Paula Prazeres Magalhães
- Luiz de Macêdo Farias
