Obtaining biocatalysts by cell permeabilization of Saccharomyces fragilis IZ 275 with lactose hydrolysis capacity
Permeabilização foi usada para
transformar células de microrganismos em
biocatalisadores com alta atividade enzimática.
As células de levedura de Saccharomyces
fragilis IZ 275 foram permeabilizadas com etanol,
como agente permeabilizante. Alta atividade
foi observada em células permeabilizadas
comparadas com células não permeabilizadas,
que apresentou nenhuma atividade enzimática.
O Delineamento Box-Behnken (DBB) com três
variáveis em três níveis compreendendo 15
corridas foi utilizado para desenvolver o modelo
estatístico de segunda ordem para a otimização
das condições da permeabilização celular para
uma alta atividade da beta-galactosidase.
A metodologia de superfície de resposta foi
utilizada para modelar o efeito da concentração
de etanol, temperatura e tempo de tratamento.
As condições de operação ótimas foram
observadas em 35 % de concentração de etanol,
temperatura de 15 ºC e tempo de tratamento de
20 minutos. Um valor máximo da atividade da
beta-galactosidase foi de 10.59 mmol ONPG.
min-1 que foi 100 % superior à atividade catalítica
das leveduras não permeabilizadas.
Obtaining biocatalysts by cell permeabilization of Saccharomyces fragilis IZ 275 with lactose hydrolysis capacity
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DOI: Atena
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Palavras-chave: agente permeabilizante, beta-galactosidase, biotecnologia microbiana, condições ótimas
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Keywords: permeabilizing agent, beta-galactosidase, microbial biotechnology, optimal conditions
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Abstract:
Permeabilization was used
to transform cells of microorganisms into
biocatalysts with an enhanced enzyme
activity. Yeast cells of Saccharomyces fragilis
IZ 275 were permeabilized with ethanol, as
permeabilizing agent. A high degree of activity
was observed in permeabilized cells comparing
with not permeabilized cells, which showed no
enzymatic activity. A three-variable, three level
Box-Behnken Design (BBD) comprising 15
experimental runs was used to develop a second
degree statistical model for the optimization
of the cells permeabilization conditions for
high activity beta-galactosidase. Response
surface methodology was used to model the
effect of concentration of ethanol, temperature
and treatment time. The optimum operating
conditions were observed at 35 % concentration
of ethanol, temperature of 15 ºC and treatment
time of 20 minutes. A maximum value of betagalactosidase
activity was 10.59 mmol ONPG.
min-1 and was ca. 100 % higher than the catalytic
activity of yeast not permeabilized.
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Número de páginas: 15
- Luiz RodrigoIto Morioka
