MANUTENÇÃO E AVALIAÇÃO IN VITRO DA VIRULÊNCIA DE CEPAS DE TOXOPLASMA GONDII
O estudo biológico e genético de Toxoplasma gondii é essencial no entendimento da relação parasito-hospedeiro. O parasito possui diferentes cepas patogênicas que podem ser analisadas através da inoculação em modelos experimentais como o cultivo celular. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferenças morfométricas e analisar o efeito citopático de isolados de Toxoplasma gondii. Os parasitos utilizados no estudo foram previamente isolados de camundongos, utilizou-se as cepas RH e a cepa Me49. Para análise do efeito citopático, foram mantidas culturas estáveis de células VERO, em meio DMEM suplementado com SBF 10%. Em seguida, a cultura foi infectada com os taquizoítos dos isolados na proporção de dois parasitos por célula. A partir da infecção, monitorou-se a interação célula/parasito por meio de fotografias com o intervalo de 12 horas, durante 7 dias. Após este processo, a confluência celular foi realizada utilizando-se o programa Image J®.Para análises morfométricas foram confeccionadas lâminas pela coloração de Panótico®. Os taquizoítos foram fotografados com utilização de fotomicroscópio e as imagens analisadas através do programa Image J® para avaliação de diferenças no comprimento longitudinal, largura na altura do núcleo e distância entre núcleo e complexo apical. Os resultados obtidos indicam que o tamanho é inversamente proporcional à patogenicidade da cepa, pois a confluência celular da cultura infectada com a cepa RH foi menor (6,34%) que a infectada por Me49 (15,89%). Além disso, a análise morfométrica da cepa Me49 em comparação com a RH demonstrou diferença significativa em pelo menos uma das variáveis analisadas. Assim, concluiu-se que o estudo do efeito citopático e da análise morfométrica de isolados de T. gondii poderão auxiliar na compreensão da complexa relação parasito-hospedeiro, podendo assim ser relacionada com diferenças na gravidade da infecção e no prognóstico da doença.
MANUTENÇÃO E AVALIAÇÃO IN VITRO DA VIRULÊNCIA DE CEPAS DE TOXOPLASMA GONDII
-
DOI: 10.22533/at.ed.1392021092
-
Palavras-chave: Alterações morfométricas, cepa Me49, efeito citopático e Toxoplasma gondii.
-
Keywords: Morphometric changes, Me49 strain, cytopathic effect and Toxoplasma gondii.
-
Abstract:
The biological and genetic study of Toxoplasma gondii is essential in understanding the parasite-host relationship. The parasite has different pathogenic strains that can be analyzed through inoculation in experimental models such as cell culture. The objective of this work was to evaluate morphometric differences and analyze the cytopathic effect of Toxoplasma gondii isolates. The parasites used in the study were previously isolated from mice, using the RH strains and the Me49 strain. For cytopathic effect analysis, stable cultures of VERO cells were maintained in DMEM medium supplemented with 10% SBF. Then, the culture was infected with the tachyzoites of the isolates in the proportion of two parasites per cell. From infection, cell/parasite interaction was monitored through photographs with the 12-hour interval for 7 days. After this process, the cellular confluence was performed using the Image J® program. For morphometric analyses, slides were made by Panotic® staining. The tachyzoites were photographed using a photomicroscope and the images analyzed through the Image J® program for evaluation of differences in longitudinal length, width in core height and distance between nucleus and apical complex. The results obtained indicate that the size is inversely proportional to the pathogenicity of the strain, because the cell confluence of the infected culture. with the RH strain was lower (6.34%) than me49 (15.89%). In addition, morphometric analysis of the Me49 strain compared to HR showed a significant difference in at least one of the variables analyzed. Thus, it was concluded that the study of the cytopathic effect and morphometric analysis of T. gondii isolates can help in understanding the complex parasite-host relationship, and may therefore be related to differences in the severity of the infection and the prognosis of disease.
-
Número de páginas: 14
- Antônio Roberto Gomes Junior
- Jéssica Yonara Souza
- Natália Domann
- Lais Silva Pinto Moraes
- Vanessa Oliveira Lopes de Moura
- Stéfanne Rodrigues Rezende
- Jaqueline Ataíde Silva Lima da Igreja
- Heloísa Ribeiro Storchilo
- Taynara Cristina Gomes
- Ana Maria de Castro
- Hanstter Hallison Alves Rezende
- Isa Marianny Ferreira Nascimento Barbosa de Souza
