IMOBILIZAÇÃO E CINÉTICA DA INVERTASE DE Saccharomyces cerevisiae EM AGAROSE
As experiências seguintes são oferecidas como hipótese que o método de imobilização não aumenta o valor de Km como publicado por alguns autores. A invertase de levedura comercial (ILC) livre foi imobilizada covalentemente em glioxil-agarose usando três suportes ativados (2,5, 5 e 10 g) e dois pHs (7 e 10) como tratamentos para avaliar a eficiência da imobilização (EI) e atividade de recuperada (ARE). A atividade foi determinada por incremento na absorbância a 490 nm usando o método colorimétrico que resulta da reação da glicose-DNS. Os valores de Km foram de 24 mM e 6,1 mM de sacarose para extrato cru e purificado, respectivamente. A imobilização ótima foi em pH 10 durante 24 h a 25ºC, 50 rpm; o suporte ativado de 5 g, ARE de 46,4%, RI de 37,5% e Vmax/Km de 65,2 de U.mg-1.mM-1. Finalmente, conclui-se que o método de imobilização não aumenta o valor do Km, este é dependente da carga de suporte oferecida e do pH de imobilização.
IMOBILIZAÇÃO E CINÉTICA DA INVERTASE DE Saccharomyces cerevisiae EM AGAROSE
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DOI: 10.22533/at.ed.88621052115
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Palavras-chave: Invertase; Saccharomyces cerevisiae; carga de suporte; pH de imobilização.
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Keywords: Invertase; Saccharomyces cerevisiae; load support; pH immobilization
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Abstract:
The following experiments are provided as a hypothesis that the method of immobilization does not raise Km values as published by some authors. Free commercial yeast invertase (CYI) was covalently immobilized in glyoxyl agarose using three activated supports (2.5, 5, and 10 g) and two pH levels (7 and 10) as treatments to assess immobilization efficiency (IE) and recovered activity (RA). Activity was determined by an increase in absorbance at 490 nm using the colorimetric method resulting from the glucose-DNS reaction. Km values were 24 mM and 6.1 mM saccharose for crude and purified extract, respectively. Optimal immobilization took place at pH 10 for 24 h at 25°C and 50 rpm with 5 g activated support, 46.4% RA, 37.5% IE, and Vmax/Km of 65.2 U.mg-1.mM-1. Finally, it is concluded the immobilization method does not increase Km values, which depend on the support load provided and immobilization pH.
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Número de páginas: 10
- Marcela Vega Ferreira
- Walter Augusto Ruiz
- RICARDO PERAÇA TORALLES
