Germinação in vitro e propagação de Cyrtopodium flavum (Orchidaceae) utilizando o seccionamento de protocormos
As sementes de Orchidaceae
geralmente possuem baixa taxa de germinação
em condições naturais. Desta forma, o cultivo
in vitro constitui uma eficiente técnica para
a sua propagação clonal e o uso de testes
rápidos para a avaliação da viabilidade das
sementes uma ferramenta importante para
isso. Diferentes explantes podem ser utilizados
na micropropagação de orquídeas, dentre eles
os protocormos, os quais apresentam grande
capacidade regenerativa e quando seccionados
desenvolvem “protocorm-like-bodies” (PLBs)
que originam plantas completas. Este trabalho
teve como objetivo estudar a viabilidade das
sementes e a germinação in vitro de Cyrtopodium
flavum, bem como a sua propagação a partir
de segmentos de protocormos seccionados e
cultivados na presença de Benzilaminopurina
(BAP). A viabilidade das sementes foi avaliada
após a coleta dos frutos e após 120 dias
de armazenamento através da imersão em
tetrazólio (1%) por até 6 horas. A semeadura
in vitro foi realizada em meio de cultura MS½.
Transcorridos 200 dias após a semeadura,
os protocormos foram seccionados
transversalmente em dois segmentos (caulinar
e radicular) e inoculados em meio de cultura
MS½ suplementado com BAP (0; 1; 2 mg.L-1),
resultando em seis tratamentos. As culturas
foram acondicionadas em B.O.D. a 24ºC ± 2ºC e
fotoperíodo de 16 horas. Avaliou-se a formação
de PLBs e/ou calos por 60 dias. A análise da
viabilidade das sementes mostrou que com 4
horas de exposição à solução de tetrazólio
as sementes desenvolveram coloração
avermelhada. Valores elevados de viabilidade
foram verificados após a coleta das cápsulas,
bem como após 120 dias de armazenamento. Maiores percentuais de regeneração de
PLBs foram obtidos a partir dos explantes caulinares em meio de cultura suplementado
com 2 mg.L-1 de BAP. As plantas regeneradas a partir dos PBLs foram aclimatizadas e
aos 30 dias de cultivo apresentaram 100% de sobrevivência.
Germinação in vitro e propagação de Cyrtopodium flavum (Orchidaceae) utilizando o seccionamento de protocormos
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DOI: 10.22533/at.ed.8512014022
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Palavras-chave: Regeneração in vitro; Orquídeas, Benzilaminopurina.
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Keywords: In vitro regeneration; Orchids, Benzylaminopurine.
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Abstract:
Orchidaceae seeds usually have low germination rates under natural
conditions. Thus, in vitro cultivation is an efficient technique for its clonal propagation
and the use of rapid tests to evaluate seed viability is an important tool for that. Different
explants can be used in micropropagation of orchids, among them the protocorms,
which have great regenerative capacity and when sectioned develop “protocorm-likebodies”
(PLBs) that originate complete plants. The objective of this research was to
study the seed viability and in vitro germination of Cyrtopodium flavum, as well as
the propagation from sectioned protocorm segments cultivated in the presence of
Benzylaminopurine (BAP). Seed viability was evaluated after collection and also after
120 days of storage by tetrazolium immersion (1%) for up to 6 hours. In vitro sowing
was performed in MS½ culture media. 200 days after sowing, the protocorms were
cross-sectioned into two segments (stem and root) and inoculated in MS½ culture
media supplemented with BAP (0; 1; 2 mg.L-1), resulting in six treatments. The cultures
were packaged in B.O.D. at 24ºC ± 2ºC and photoperiod of 16 hours. After 60 days
the formation of PLBs and/or callus was evaluated. Seed viability analysis showed that
after 4 hours of exposure to tetrazolium solution, the seeds developed reddish color.
High viability values were verified after capsule collection as well as after 120 days of
storage. Higher percentages of PLBs regeneration were obtained from stem explants
in culture medium supplemented with 2 mg.L-1 BAP. Plants regenerated from PBLs
were acclimatized and at 30 days of cultivation had 100% survival.
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Número de páginas: 15
- Fabielle Garcia Zandonadi da Cruz
- Carina Kozera
- Samara Zanella
- Suzana Stefanello
