Germinação de sementes, indução e análise morfo-histológica de calos de Myrciraria glomerata (O. Berg) Amshoff
Popularmente conhecida como cabeludinha, a Plinia glomerata (O. Berg) Amshoff é uma espécie nativa e típica da região da Mata Atlântica. Como a planta ainda se encontra em fase de domesticação, estudos relacionados à propagação e à seleção de genótipos promissores para a propagação in vitro são necessários, pois o cultivo in vitro é uma importante ferramenta em programas de conservação de recursos genéticos e melhoramento genético. Objetivou-se realizar a germinação in vitro de sementes de P. glomerata utilizando diferentes concentrações de ácido giberélico, a organogênese in vitro de explantes foliares com diferentes concentrações de BAP combinado com ANA e a análise histológica dos calos. Para germinação in vitro, foram realizados dois experimentos: 1) sementes foram primeiramente embebidas por 24 horas em água estéril antes da assepsia em hipoclorito de sódio e 2) sementes primeiramente foram desinfestadas e depois embebidas por 24 horas em água estéril. Utilizou-se o meio de cultura MS para a germinação in vitro com diferentes concentrações de GA3:1) tratamento controle, sem adição de regulador vegetal; T2) 0,5 mg L-1 de GA3; T3) 1,0 mg L-1 de GA3; T4) 2,0 mg L-1 de GA3; T5) 5,0 mg L-1 de GA3; T6) 10,0 mg L-1 de GA3. Para a organogênese foram utilizadas folhas de plântulas germinadas in vitro. Os explantes foram inoculadas em meio MS em seis tratamentos:1) 0 mg L-1 de BAP, 2) 0,1 mg L-1 de BAP, 3) 0,25 mg L-1 de BAP, 4) 0,5 mg L-1 de BAP, 5) 1,0 mg L-1 de BAP e 6) 2,0 mg L-1 de BAP, todos combinados com 0,1 mg L-1 de ANA. Para a análise histológica de calos foram utilizados calos cultivados em meio MS suplementados com 1,0 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA e fixados em FAA 50 por 48horas e transferidos para álcool etílico 70% (v/v). As amostras foram seccionadas no sentido transversal na espessura de 5 µm com auxílio de um micrótomo de e coradas com azul de tuluidina 0,05% em fosfato tampão 0,1 M (pH 6,8). Após 30 dias de cultivo in vitro, que nas sementes do experimento 1, houve a emissão da raiz primária e parte aérea. No entanto, não houve germinação em nenhum tratamento com GA3 do experimento 2. Para porcentagem de germinação in vitro, observou-se um incremento na germinação proporcional ao aumento da concentração, variando entre 2,5% no tratamento controle e 85% na concentração de 10 mg L-1 de GA3, demostrando que as sementes de P. glomerata necessitam de aplicação exógena desse regulador vegetal para otimizar a germinação in vitro. Na organogênese, quando se utilizou 1,0 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de ANA (T5), 92% de explantes apresentaram calos. Nas análises histológicas, foi possível observar a formação indireta de raiz adventícia.
Germinação de sementes, indução e análise morfo-histológica de calos de Myrciraria glomerata (O. Berg) Amshoff
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DOI: 10.22533/at.ed.7772223063
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Palavras-chave: cabeludinha, GA3, rizogênese.
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Keywords: cabeludinha, GA3, rizogenesis
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Abstract:
Popularly known as cabeludinha, P. glomerata (O. Berg) Amshoff is a native and typical species of the Atlantic Forest region. Still in the domestication phase, some aspects of propagation and selection of promising genotypes for in vitro propagation are needed, and development of in vitro culture protocols is very important for genetic resources maintenance programs and for genetical enhancement. This study aimed perform the in vitro germination of seeds P. glomerata using different concentrations of gibberellic acid, in vitro organogenesis of leaf explants with different BAP concentrations combined with ANA and histological analysis of calluses. For in vitro germination, two experiments were conducted: 1) seeds were first embedded for 24 hours in sterile water prior to sodium hypochlorite asepsis and 2) seeds were first sterilized and then embedded for 24 hours in sterile water. It was used MS medium for germination in vitro with different concentrations of GA3: 1) control treatment without addition of plant growth regulator; T2) 0.5 mg L-1 GA3; T3) 1.0 mg L-1 GA3; T4) 2.0 mg L-1 GA3; T5) 5.0 mg L-1 GA3; T6) 10.0 mg L-1 GA3. During organogenesis seedling leaves were germinated in vitro. The explants were inoculated in MS six treatments: 1) 0 mg L-1 BAP, 2) 0.1 mg L-1 BAP, 3) 0.25 mg L-1 BAP, 4) 0.5 mg L-1 BAP, 5) 1.0 mg L-1 BAP and 6) 2.0 mg L-1 BAP, all combined with 0.1 mg L-1 NAA. After 30 days of in vitro culture, the seeds of the first experiment presented issue of primary root and shoot. However there was no germination in treatments with GA3 at the second experiment. For the variable in vitro germination percentage was observed an increase in germination proportional to the increase in concentration ranging from 2.5% in the control treatment and 85% in the concentration 10 mg L-1 GA3, showing that P. glomerata seeds require exogenous application of growth regulator to the higher percentage germination occurs. During organogenesis, in the fifth treatment, 92% of explants presented callus. After histological analysis, we observed the indirect formation of adventitious root.
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Número de páginas: 22
- Fernanda Pinto
- Rodrigo Kelson Silva Rezende
- Cláudia Roberta Damiani
- Silvia Correa Santos