Extração via ultrassom da beta-galactosidase de Saccharomyces fragilis IZ 275 cultivada em soro com potencial para hidrólise da lactose
A beta-galactosidade tem por função
a hidrólise da lactose em dois monossacarídeos,
glicose e galactose, possíveis de serem
metabolizados por indivíduos com intolerância
à lactose. O objetivo do trabalho foi verificar
a condição de extração da enzima betagalactosidase
de Saccharomyces fragilis IZ 275
cultivada em soro de queijo por ultrassom através
da metodologia de superfície de resposta. Foi
realizada a fermentação utilizando a levedura
Saccharomyces fragilis IZ 275 em soro de
queijo in natura, as condições de cultivo foram
35ºC, 150 rpm e 24 horas de fermentação. Em
seguida foi realizado o processo de extração
por ondas ultrassônicas utilizando 40 mL do
meio de fermentação seguindo delineamento
estatístico Box-Benheken com 9 corridas,
tendo como variáveis independentes e níveis o
tempo (3, 6 e 9 minutos) e potência (75, 223
e 372 w/cm²). Após a extração a suspensão
celular foi centrifugada a 3500 rpm, 4ºC por
20 minutos. Em seguida 1 e 10% (v/v) do
sobrenadante contendo a enzima extraída foi
adicionado em 10 mL de solução de lactose 5%
(p/v), incubadas em estufa a 37ºC por 2 horas.
Após 2 horas, as amostras foram aquecidas
a 95ºC durante 10 minutos para a inativação
da atividade enzimática. A determinação da
atividade enzimática foi através da quantificação
da glicose produzida via hidrólise da lactose
pela beta-galactosidase, sendo realizada
pelo método glicose-oxidase. Baseado no
delineamento de Box-Benhken a máxima
hidrólise com 1% de enzima foi no ensaio 9 com
5,66% nas condições de extração de 9 minutos
e potência de 372 w/cm². A máxima hidrólise
com 10% de enzima foi o ensaio 7 com 66,47%,
nas condições de 3 minutos e potência de 372 w/cm² de extração.
Extração via ultrassom da beta-galactosidase de Saccharomyces fragilis IZ 275 cultivada em soro com potencial para hidrólise da lactose
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DOI: 10.22533/at.ed.86919260417
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Palavras-chave: Hidrólise, enzima, beta-galactosidade, ultrassom
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Keywords: Hydrolysis, enzyme, beta-galactosidase, ultrasound
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Abstract:
Beta-galactose functions as the hydrolysis of lactose in two
monosaccharides, glucose and galactose, which can be metabolised by individuals with
lactose intolerance. The objective of this work was to verify the extraction condition of
the enzyme beta-galactosidase from Saccharomyces fragilis IZ 275 cultured in cheese
serum by ultrasound using the response surface methodology. The fermentation was
carried out using Saccharomyces fragilis IZ 275 yeast in fresh cheese serum, culture
conditions were 35 ° C, 150 rpm and 24 hours fermentation. Then, the ultrasonic wave
extraction process was performed using 40 mL of the fermentation medium followed
by a 9-race Box-Benheken statistical design, with independent variables and time (3,
6 and 9 minutes) and power (75, 223 and 372 w / cm 2). After extraction the cell
suspension was centrifuged at 3500 rpm, 4 ° C for 20 minutes. Then 1 and 10% (v
/ v) of the supernatant containing the extracted enzyme was added in 10 mL of 5%
(w / v) lactose solution, incubated in an oven at 37 ° C for 2 hours. After 2 hours, the
samples were heated at 95 ° C for 10 minutes to inactivate the enzymatic activity. The
determination of the enzymatic activity was through the quantification of the glucose
produced by hydrolysis of lactose by beta-galactosidase, being carried out by the
glucose oxidase method. Based on the Box-Benhken design the maximum hydrolysis
with 1% of enzyme was in assay 9 with 5.66% in the extraction conditions of 9 minutes
and power of 372 w / cm². The maximum hydrolysis with 10% of enzyme was assay
7 with 66.47%, in the conditions of 3 minutes and power of 372 w / cm² of extraction.
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Número de páginas: 15
- Ana Caroline Iglecias Setti
- Alessandra Bosso
- Samuel Guemra
- Hélio Hiroshi Suguimoto
- Luiz Rodrigo Ito Morioka
- Ariane Bachega
