EXPRESSÃO DAS PROTEÍNAS DO CAPSÍDEO E NS3 DO ZIKA VÍRUS EM Escherichia coli
O Zika vírus (ZIKV) é um arbovírus
da família Flaviviridae, oriundo da Floresta de
Zika, na Uganda. O primeiro surto da doença
deu-se em 2007 na Ilha de Yap, nos Estados
Federados da Micronésia sendo confundida
com o vírus dengue (DENV), uma vez que os
testes diagnósticos da época comprovaram
IgM positivo para o DENV. Porém, os sintomas
apresentavam-se diferentes dos usuais e
somente após análises por meio da Reação em
Cadeia da Polimerase (PCR) realizadas pelo
Centro de Controle e Prevenção de Doenças
(CDC) o ZIKV foi confirmado. No Brasil, a
doença ganhou notabilidade nos anos de 2014 e
2015 com o aumento de casos de microcefalia,
além de casos de distúrbios neurológicos e
Síndrome de Guillain-Barré. Neste trabalho
foram realizadas clonagens e expressão dos
genes que codificam as proteínas do capsídeo
(C) e não estrutural 3 (NS3) do Zika vírus em
linhagens de E. coli. Para a multiplicação do
inserto os plasmídeos recombinantes foram
transformados em E. coli BL21, seguido de sua
indução com diferentes concentrações de IPTG
e temperatura para a análise da expressão das
proteínas por SDS-PAGE e Western Blotting.
Os resultados se mostraram satisfatórios com
a produção da proteína de maneira igualitária
nas três diferentes concentrações de IPTG e
temperatura testadas. Ambas as proteínas C
e NS3 foram expressas no tamanho esperado
de aproximadamente 19,1 kDa e 56,7 kDa,
respectivamente. Tais resultados, ampliam
a disponibilidade de antígenos para serem
utilizados na composição de vacinas e em testes diagnósticos contra o Zika vírus no mercado brasileiro.
EXPRESSÃO DAS PROTEÍNAS DO CAPSÍDEO E NS3 DO ZIKA VÍRUS EM Escherichia coli
-
DOI: 10.22533/at.ed.1141911021
-
Palavras-chave: Zika vírus. Microcefalia. Proteina Recombinante. Capsídeo. NS3.
-
Keywords: Zika virus. Microcephaly. Recombinant Protein. Capsid. NS3.
-
Abstract:
Zika virus (ZIKV) is an arbovirus of the Flaviviridae family, from the Zika
Forest in Uganda. The first outbreak of the disease occurred in Yap Island, Federated
States of Micronesia, where it was confused with Dengue virus (DENV), since
diagnostic tests at the time proved IgM positive for DENV. However, the symptoms
were different from the usual ones and only after the analysis by Polymerase Chain
Reaction (PCR) carried out by the Centers for Disease Control and Prevention (CDC)
ZIKV was confirmed. In Brazil, the disease increased in the years 2014 and 2015 with
the increased cases of microcephaly, in addition to cases of neurological disorders and
Guillain-Barré syndrome. In this work, cloning and expression of the genes coding for
capsid (C) and non-structural 3 (NS3) proteins of Zika virus were carried out in E. coli
strains. For the multiplication of the insert the recombinant plasmids were transformed
into E. coli BL21, followed by their induction with different concentrations of IPTG
and temperature for the analysis of the expression of the proteins by SDS-PAGE and
Western Blotting. The results were satisfactory with protein production equally in the
three different concentrations of IPTG and temperature tested. Both the C and NS3
proteins were expressed in the expected size of approximately 19.1 kDa and 56.7
kDa, respectively. These results increase the availability of antigens to be used in the
composition of vaccines and in diagnostic tests against the Zika virus in the Brazilian
market.
-
Número de páginas: 15
- Ilana Carneiro Lisboa Magalhães
- Mario Alberto Maestre Herazo
- Lívia Érika Carlos Marques
- Eridan Orlando Pereira Tramontina Florean,
- Maria Izabel Florindo Guedes
- Maria Lorena Bonfim Lima
