ESTABELECIMENTO DE MODELO EXPERIMENTAL ANIMAL PARA AVALIAÇÃO DA CARCINOGÊNESE MAMÁRIA PELO DMBA UTILIZANDO A TÉCNICA DA RT-qPCR
Mecanismos moleculares de genes e a interação dos hidrocarbonetos aromáticos policíclicos (HAPs) têm sido relacionados com a carcinogênese mamária. O 7,12-dimetilbenzantraceno (DMBA) é um HAPs utilizado para induzir o desenvolvimento do câncer de mama em modelos experimentais animais. A técnica da Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real precedida por transcrição reversa (RT-qPCR) pode ser utilizada para avaliar a expressão de genes em resposta ao tratamento à determinada substância química. Foram utilizados 21 ratos Wistar fêmeas divididas em dois grupos: Grupo Controle Positivo (com DMBA) e Grupo Controle Negativo (sem DMBA). Após noventa dias de experimentação foi realizada a eutanásia dos animais e remoção cirúrgica das mamas. O RNA foi extraído e o cDNA foi obtido para a análise genética. Utilizando a técnica da RT-qPCR, verificou-se um aumento na expressão de quinze genes no Grupo Controle Positivo (tratado com DMBA), enquanto dois genes apresentaram a expressão diminuída. Dez genes da classe dos proto-oncogenes apresentaram aumento da expressão gênica, demonstrando uma possível relação com o processo carcinogênico. E cinco genes supressores de tumor, também apresentaram aumento da expressão gênica. O estabelecimento da técnica da RT-qPCR permitiu a avaliação do potencial carcinogênico do DMBA, abrindo a perspectiva da realização de análises de outras substâncias, como por exemplo, extratos de plantas medicinais.
ESTABELECIMENTO DE MODELO EXPERIMENTAL ANIMAL PARA AVALIAÇÃO DA CARCINOGÊNESE MAMÁRIA PELO DMBA UTILIZANDO A TÉCNICA DA RT-qPCR
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DOI: 10.22533/at.ed.9962016097
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Palavras-chave: 7,12-dimetilbenzantraceno (DMBA); câncer de mama; RT-qPCR
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Keywords: 7,12 - dimethylbenzanthracene (DMBA); breast cancer; RT-qPCR
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Abstract:
Molecular mechanisms of genes and interaction of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) have been related to breast carcinogenesis. 7,12-dimethylbenzanthracene (DMBA) is a PAH used to induce the development of breast cancer in experimental animal models. The Real-Time Polymerase Chain Reaction technique preceded by reverse transcription (RT-qPCR) can be used to evaluate gene expression in response to treatment with a given chemical substance. Twenty one female Wistar rats were divided into two groups: Positive Control Group (with DMBA) and Negative Control Group (without DMBA). After ninety days of experimentation the animals were euthanized and their breasts surgically removed. RNA was extracted and cDNA was obtained for genetic analysis using the RT-qPCR technique. There was an increase in gene expression of fifteen genes in the Positive Control Group (treated with DMBA), while two genes presented a decreased expression. Ten genes from proto-oncogene class showed increased gene expression, demonstrating a possible relationship with the carcinogenic process. And five tumor suppressor genes also showed increased gene expression. The establishment of RT-qPCR technique allowed the evaluation of the carcinogenic potential of DMBA, opening the perspective of carrying out analyses of other substances, such as medicinal plant extracts.
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Número de páginas: 15
- Alice Maria de Souza-Kaneshima
- João Paulo Salvaterra Pasquini
- Sheila Alexandra Belini Nishiyama
- Tania Cristina Alexandrino Becker
- Edilson NobuyoshiKaneshima