EFEITO DO BIOFILME DE Arthrographis kalrae NA RESPOSTA IMUNE DE MACRÓFAGOS INFECTADOS
Arthrographis kalrae é um fungo termodimórfico que causa uma síndrome neurológica complexa e lesões em diferentes órgãos em camundongos. É um fungo considerado raro em humanos, porém em diferentes países já foi descrito em diversas manifestações clínicas humanas, como ceratites, sinusites, meningites, eumicetoma e onicomicoses. Considerando que na literatura há poucos estudos sobre os fatores de virulência e a patogenicidade de A. kalrae, o objetivo deste estudo foi analisar a resposta imunopatológica de macrófagos infectados com células planctônicas e com biofilme de A. kalrae. Para isto, foi realizado ensaio de biofilme em placas de poliestireno em diferentes tempos de incubação (4, 12, 24, 36 e 48 horas), com quantificação da biomassa total através da coloração de cristal violeta. Para avaliação da resposta imunopatológica, macrófagos RAW 264.7 foram tratados e/ou infectados de acordo com os seguintes grupos: sem tratamento e/ou infecção, infectados com células planctônicas, infectados com células de biofilme, tratados com LPS, tratados com LPS e infectados com células planctônicas e tratados com LPS e infectados com células de biofilme por 15, 24 e 48 horas. Em seguida, a produção de óxido nítrico (ON) foi quantificada através do método de Griess. Para análise estatística, assumiu-se como significativo p-valor < 0,05. Através deste estudo, obtivemos os seguintes resultados: a formação in vitro de massa de biofilme de A. kalrae aumenta com o decorrer do tempo; ocorre inibição na produção de ON pelos macrófagos infectados por A. kalrae na sua forma planctônica (p<0,0001), sendo esta inibição ainda maior com as células de biofilme em relação a sua forma planctônica (p<0,0001). Concluímos pelo estudo que o fungo A. kalrae induz supressão na produção de ON pelos macrófagos infectados por A. kalrae, e que essa supressão pode ser intensificada na sua forma de biofilme, evidenciando desta forma um de seus mecanismos de patogenicidade.
EFEITO DO BIOFILME DE Arthrographis kalrae NA RESPOSTA IMUNE DE MACRÓFAGOS INFECTADOS
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DOI: 10.22533/at.ed.4172217016
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Palavras-chave: Células planctônicas, Fatores de virulência, Óxido Nítrico
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Keywords: Nitric oxide, planktonic cells, virulence factors
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Abstract:
Arthrographis kalrae is a thermodimorphic fungus that causes a complex neurological syndrome and damage to different organs in mice. It is a fungus considered rare in humans, but in different countries it has been described in several human clinical manifestations, such as keratitis, sinusitis, meningitis, eumycetoma and onychomycosis. Considering that in the literature, there are few studies on the virulence factors and pathogenicity of A. kalrae, the aim of this study was to analyze the immunopathological response of macrophages infected with planktonic cells and with A. kalrae biofilm. For this, a biofilm assay was performed on polystyrene plates at different incubation times (4, 12, 24, 36 and 48 hours), with quantification of the total biomass through crystal violet staining. To assess the immunopathological response, RAW 264.7 macrophages were treated and/or infected according to the following groups: without treatment and/or infection, infected with planktonic cells, infected with biofilm cells, treated with LPS, treated with LPS and infected with planktonic cells and treated with LPS and infected with biofilm cells for 15, 24 and 48 hours. Then, the production of nitric oxide (NO) was quantified by the Griess method. For statistical analysis, p-value < 0.05 was assumed to be significant. Through this study, we obtained the following results: in vitro biofilm mass formation of A. kalrae increases over time; there is inhibition of NO production by macrophages infected by A. kalrae in its planktonic form (p<0.0001), and this inhibition is even greater with biofilm cells in relation to its planktonic form (p<0.0001). We conclude from the study that the fungus A. kalrae induces NO production suppression by macrophages infected by A. kalrae, and that this suppression can be intensified in its biofilm form, thus evidencing one of its pathogenicity mechanisms.
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Número de páginas: 13
- Janneth Josefina Escobar Arcos
- Bruno Fernando Cruz Lucchetti
- Phileno Pinge Filho
- Mario Augusto Ono
- Ayako Sano
- Luciene Airy Nagashima
- Adriane Lenhard-Vidal
- Franciele Ayumi Semêncio Chiyoda-Rodini
- Eiko Nakagawa Itano
- Bianca Dorana de Oliveira Souza
