EFEITO DA FOSFOLIPASE PRESENTE NA TOXINA DE Bothrops moojeni FRENTE A BIOFILME DE Staphylococcus aureus
A capacidade das bactérias de
adquirirem multirresistências a antibióticos e de
formarem colônias sésseis, denominadas de
biofilme, aumentam a morbidade e mortalidade
de pacientes internados. Para combater esse
problema, uma linha importante de pesquisas
ocorre utilizando moléculas naturais, como
por exemplo, proteínas presentes na peçonha
de serpentes, onde podemos destacar as
fosfolipases A2, enzimas capazes de hidrolisar
fosfolipídios de membranas. Estas moléculas
apresentam atividades como: antiviral,
antifúngica, antibacteriana e antitumoral.
O objetivo deste trabalho foi purificar uma
fosfolipase A2 (PLA2) da toxina de Bothrops
moojeni, avaliando pela primeira vez o seu
potencial contra biofilme de S. aureus meticilina
resistente. A purificação da PLA2 foi realizado
por meio de etapas cromatográficas, envolvendo
exclusão molecular (Sephacryl S-100) seguida
de fase reversa (C-18). A massa molecular,
sugerida por SDS-PAGE para a enzima foi
de 14 kDa. Todos os passos de purificação
foram monitorados por atividade enzimática
específica, com o substrato 4N3OBA. De posse
da PLA2 purificada, esta foi avaliada contra
a bactéria resistente S. aureus formadora de
biofilme. Com o resultado do bioensaio foi
possível detectar uma redução no crescimento
bacteriano na concentração de 512 μg.mL-1
(36,6 μM). De acordo com resultados obtidos
fica demonstrado pela primeira vez a atividade de uma fosfolipase frente a bactéria
formadora de biofilme.
EFEITO DA FOSFOLIPASE PRESENTE NA TOXINA DE Bothrops moojeni FRENTE A BIOFILME DE Staphylococcus aureus
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DOI: atena
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Palavras-chave: Bothrops, fosfolipase, atividade antibiofilme.
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Keywords: Bothrops, phospholipase, activity antibiofilm
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Abstract:
The morbidity and mortality of inpatients are caused due to bacteria skills
to acquire antibiotics multidrug resistance to form sessile colonies, called biofilms. To
combat this problem, an important line of research is the use of natural molecules, such
as proteins present in the snake venom, highlighting to phospholipases A2 (PLA2),
enzymes capable of hydrolyzing phospholipid membranes. In the literature PLA2 from
snake venom demonstred activities against antiviral, antifungal, antibacterial and
antitumor. Therefore the objective of this work was to purify a PLA2 from Bothrops
moojeni toxin, evaluating for the first time its potential against methicillin resistant
S. aureus biofilm. Purification of PLA2 was performed by chromatographic steps,
involving molecular exclusion (Sephacryl S-100) followed by reverse phase (C-18). The
molecular mass suggested by SDS-PAGE for the enzyme was 14 kDa. All purification
steps were monitored by enzymatic activity, with the specific substrate 4N3OBA. Lastly,
the purified PLA2, was evaluated against the biofilm S. aureus bacteria. The bioassay
results showed clear reduction in biofilm development in the concentration 512 μg.mL-1
(36.6 μM). In conclusion, the activity of PLA2 purified was efectiveness against the
biofilm forming bacteria being demonstrated for the first time.
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Número de páginas: 15
- Patrícia Souza e Silva
- Guilherme Augusto Abrantes
- Odaias Pereira Almeida Filho
- Elizangela de Barros
- Paula Helena Santa Rita
- Luiz Humberto Guimarães Riquelme Junior
- Ludovico Migliolo
- Breno Emanuel Farias Frihling
