DIAGNÓSTICO MOLECULAR QUALITATIVO POR PCR PARA DETECÇÃO DE Leishmania sp. EM CÃES
INTRODUÇÃO: A Leishmaniose é uma doença de caráter zoonótico causada por um protozoário intracelular e transmitida à mamíferos por um vetor invertebrado. O aumento da incidência desta enfermidade é vinculado a fatores como a dificuldade em eliminar reservatórios, diversidade epidemiológica das regiões afetadas, altos custos financeiros para sustentação de ações de controle e alta capacidade de adaptação do vetor. Por este motivo, vem sendo necessário maiores estudos e pesquisas relacionados a esta doença. Em busca de um diagnóstico seguro e rápido, técnicas moleculares como a PCR vêm sendo estudadas já que os exames diagnósticos mais utilizados, entre eles a sorologia, comumente apresentam resultados falsos positivos devido sua alta sensibilidade. OBJETIVOS: Utilizar a técnica de PCR para detectar Leishmania sp. em amostras de mucosa ocular e linfonodo de cães participantes do inquérito sorológico das cidades de Sorocaba e Salto de Pirapora. MÉTODOS: Foram coletados aspirados de linfonodos reativos e fricção de um SWAB estéril na mucosa ocular, passando por extração de DNA seguido por análise em PCR, com seu produto corrido em eletroforese utilizando gel de agarose para a visualização dos resultados. RESULTADOS: Das 109 amostras conjuntivais analisadas, 22 apresentaram resultados positivos. Esta ocorrência se dá devido ao grande fluxo sanguíneo local que propicia a permanência da Leishmania dentro de macrófagos. Em relação as amostras de linfonodo, estas não apresentaram nenhum resultado positivo, mesmo sabendo-se que o protozoário possui tropismo por tecido linfóide. A PCR como método diagnóstico é válida e pode ser associada a outros testes, assim como pode ser utilizada em pesquisas de campo de larga escala, visto que o teste proposto utiliza amostras de fácil e rápida coleta, além de não invasiva. Este teste também se mostra importante ao permitir o diagnóstico precoce de animais assintomáticos ou imunossuprimidos.
DIAGNÓSTICO MOLECULAR QUALITATIVO POR PCR PARA DETECÇÃO DE Leishmania sp. EM CÃES
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DOI: 10.22533/at.ed.06020160611
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Palavras-chave: Leishmania sp. PCR. Cães.
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Keywords: Leishmania sp. PCR. Dogs.
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Abstract:
INTRODUCTION: Leishmaniasis is a zoonotic disease caused by an intracellular protozoan and transmitted to mammals by an invertebrate vector. The increase in the incidence of this disease is linked to factors such as difficulty in eliminating reservoirs, epidemiological diversity in affected regions, high financial costs to support control actions and high capacity to adapt the vector. For this reason, further studies and research related to this disease have been necessary. In search of a safe and fast diagnosis, molecular techniques such as PCR have been studied since the most used diagnostic exams, including serology, false results are commonly found that affect their high sensitivity. OBJECTIVES: To use PCR technique to detect Leishmania sp. in samples of ocular mucosa and lymph node from dogs participating in the serological study in the cities of Sorocaba and Salto de Pirapora. METHODS: Reactive lymph node was aspirated, and the ocular mucosa was collected by rubbing a sterile SWAB, undergoing DNA extraction after PCR analysis, with its product corrected in electrophoresis using agarose gel to answer the results. RESULTS: Of the 109 samples analyzed, 22 obtained positive results. This occurrence is due to the large local blood flow that allows Leishmania to remain within macrophages. Regarding the lymph node samples, these did not present any positive results, even though they know that the protozoan has tropism by lymphoid tissue. A PCR as a diagnostic method is valid and can be associated with other tests, as well as it can be used in large-scale field research, since it is a test used using easy and fast collection applications, in addition to being non-invasive. This test also shows the importance of allowing the early diagnosis of asymptomatic or immunosuppressed animals.
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Número de páginas: 15
- Natália Bilesky José
- Andrea Cristina Higa Nakaghi
- Renata de Lima
- Mariana Bibries Carvalho Silva
