Determinación de Melón Necrotic Spot Virus, MNSV, desde suelo mediante método molecular.
MNSV es una enfermedad que afecta a especies de la familia cucurbitáceas,
especialmente melón. Se manifiesta con necrosis en hipocotilo y
marchitamiento de las plantas adultas. El virus se transmite por semilla,
limitando a empresas productoras de estas. Como medida de prevención se
realizan análisis de suelo antes de establecer el cultivo en campo, para
determinar la presencia del vector (Olpidium bornovanus, syn O. radicale), pero
los métodos convencionales (cultivo trampa) son de gran duración, pudiendo
tener resultados hasta en 60 días. Para reducir este tiempo, en la temporada
2020-2021, en la empresa Antufen Seeds Ltda. se realizaron ensayos de
análisis mediante qPCR, directamente a suelos sospechosos. Las muestras
fueron tomadas desde los primeros 15cm de suelo y trasladadas hasta el
laboratorio, donde se agitaron por 4 horas con tampón de extracción. Desde el
sobrenadante se tomaron las alícuotas que se procesaron de acuerdo con el
protocolo de Extracción de RNA Promega y posteriormente con protocolo de la
Initiative for Seed Health vegetables de la International Seed Federation (ISF),
mediante técnica de qPCR. Los resultados obtenidos fueron comparados con
resultados de método convencional. Del total de los suelos que presentaron
plantas infectadas, de acuerdo con análisis ELISA de raíz cultivo trampa, entre
un 80 y un 100% resultaron positivos en qPCR. Se concluye que es posible
detectar la presencia de MNSV directamente desde suelo a través de método
molecular acortando los tiempos de obtención de resultados de 60 a 4 días.
Determinación de Melón Necrotic Spot Virus, MNSV, desde suelo mediante método molecular.
-
DOI: 10.22533/at.ed.4802325079
-
Palavras-chave: -
-
Keywords: -
-
Abstract:
MNSV is a disease that affects species of the Cucurbitaceae family, especially
melon. It manifests with a necrosis in the hypocotyls and wilting of adult plants.
The virus is transmitted by seed, limiting to companies that produce these. As a
preventive measure, soil analyzes are carried out before establishing the crop in
the field, to determine the presence of the vector (Olpidium bornovanus, syn O.
radicale), but conventional methods (trap crop) take long time and can have the
results up to in 60 days. To reduce this time, in the 2020-2021 season, the
company Antufen Seeds Ltda. carried out analysis tests using qPCR, directly on
suspected soils. The samples were taken from the first 15cm of soil and
transferred to the laboratory, where they were shaken for 4 hours with
extraction buffer. Aliquots were taken from the supernatant and processed
according to the Promega RNA Extraction protocol and subsequently with the
protocol of the Initiative for Seed Health vegetables of the International Seed
Federation (ISF), using the qPCR technique. The results obtained were
compared with results of the conventional method. Of the total number of soils
that presented infected plants, according to ELISA analysis of the trap crop
root, between 80 and 100% were positive in qPCR. It is concluded that it is
possible to detect the presence of MNSV directly from the soil through the
molecular method, shortening the time to obtain results from 60 to 4 days.
- Alexandra Herrera B.
- María José Pichuante A.
- Bárbara Abarca C.
- Claudio Sandoval B.
