DETECÇÃO ESPECÍFICA DE SCHISTOSOMA MANSONI EM LCR USANDO UM BIOSSENSOR ELETROQUÍMICO DE DNA BASEADO EM NANOPARTICULAS DE OURO E MERCAPTOSILANO
O Sistema Nervoso é o sítio ectópico mais comumente infectado pelo Schistosoma mansoni. Estima-se que o acometimento neurológico oscila entre 20% e 30% dos portadores de esquistossomose. Apesar dos ensaios de laboratório disponíveis, o diagnóstico da neuroesquistossomose é em grande parte presuntivo, e baseado na clínica. Assim, o emprego de metodologias diagnósticas alternativas que permitam a eficiente detecção do parasita mesmo em baixas concentrações deverá contribuir muito para o controle desta doença. Este trabalho possui como objetivo a avaliação do processo de montagem de camadas auto-montadas de 3-mercaptopropiltrimetoxisilano (MPTS) e posterior deposição eletroquímica de nanopartículas de ouro (NPsAu) que oferecem uma boa abordagem para a imobilização da sonda de DNA modificada com tiol no desenvolvimento de um genossensor para uso na detecção de Schistosoma mansoni em líquido cefalorraquidiano (LCR). Utilizamos sonda de DNA imobilizada no eletrodo para ensaios de hibridização. O sinal gerado foi monitorado pelas técnicas eletroquímicas espectroscopia de impedância eletroquímica e voltametria cíclica que são ferramentas importantes para a compreensão dos processos de interação que ocorrem na interface solução/eletrodo que mostraram alterações significativas nas correntes amperométricas e na resistência à transferência de carga após a exposição ao DNA do Schistosoma mansoni. A partir da análise dos resultados foi possível verificar que o sistema desenvolvido manteve a capacidade de estabelecer uma imobilização estável da molécula de DNA específico para a esquistossomose. Desta forma, o sensor desenvolvido foi eficiente na detecção de Schistosoma mansoni presente em amostras de LCR em diferentes concentrações com um limite de detecção de 0,6 pg.μL-1.
DETECÇÃO ESPECÍFICA DE SCHISTOSOMA MANSONI EM LCR USANDO UM BIOSSENSOR ELETROQUÍMICO DE DNA BASEADO EM NANOPARTICULAS DE OURO E MERCAPTOSILANO
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DOI: 10.22533/at.ed.2192016016
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Palavras-chave: Neuroesquistossomose; genossensores; nanopartículas de Ouro; Eletroquímica.
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Keywords: Neuroschistosomiasis; Genosensors; Gold Nanoparticles; Electrochemical.
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Abstract:
The Nervous System is the ectopic site most commonly infected with Schistosoma mansoni. It is estimated that neurological involvement ranges from 20% to 30% of schistosomiasis patients. Although laboratory tests available, diagnosis of neuroschistosomiasis, particularly the spinal cord disorder, is largely presumed, based on clinic. Therefore, the use of alternative diagnostic methodologies that allow efficient detection of the parasite even at low concentrations should contribute much to the control of this disease [1]. The present work aims to evaluate the assembly process of self-assembled layers of 3-mercaptopropyltrimethoxysilane (MPTS) and subsequent electrochemical deposition of gold nanoparticles (NPsAu) that offer a good approach for the immobilization of the thiol-modified DNA probe in the development of a genosensor for use in the detection of Schistosoma mansoni in cerebrospinal fluid (CSF). We used DNA probe immobilized on the electrode for hybridization assays. The generated signal was monitored by electrochemical techniques as electrochemical impedance spectroscopy and cyclic voltammetry, which are important tools for understanding the interaction processes that occur at the solution / electrode interface that showed significant changes in amperometric currents and resistance to load transfer after exposure to Schistosoma mansoni DNA. From the analysis of the results it was possible to verify that the developed system maintained the ability to establish a stable immobilization of the specific DNA molecule for schistosomiasis. Thus, the developed sensor was efficient in the detection of Schistosoma mansoni present in CSF samples at different concentrations with a detection limit of 0.6 pg.μL-1.
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Número de páginas: 14
- Fabio Lopes de Melo
- Cesar Augusto Souza de Andrade
- Maria Danielly Lima de Oliveira
- GISELLE SOARES DOS SANTOS