DESENVOLVIMENTO, PADRONIZAÇÃO E VALIDAÇÃO DE MÉTODO DE PCR EM TEMPO REAL PARA O DIAGNÓSTICO ESPECÍFICO DE PSEUDOCOWPOXVIRUS - PCPV EM BOVINOS
O Brasil apresenta uma forte
atuação na comercialização mundial de carnes,
liderando o ranking mundial como o maior
exportador de carne bovina e detentor de uns
dos maiores rebanhos do mundo. Por esta
razão, qualquer doença disseminada que resulte
em prejuízos ou que imponham restrições ao
comércio de animais e aos produtos impacta
desfavoravelmente toda a economia nacional.
As doenças causadas por Parapoxvirus (PPV)
possuem grande importância no cenário da
pecuária brasileira, tanto pela possibilidade
de gerar intensos prejuízos econômicos,
quanto pela alta vulnerabilidade humana.
Considerando os inúmeros casos descritos
de infecções causados por PPV no país
e por apresentarem sintomatologia clínica
semelhante com as causadas pelo vírus
da febre aftosa, torna-se imprescindível o
desenvolvimento de diagnósticos laboratoriais
bem estruturados e aptos para detecção rápida
e específica, proporcionando a diferenciação
do agente etiológico. Neste trabalho são
relatados procedimentos da validação do
método de PCR em tempo real para detecção
do Pseudocowpoxvirus (PCPV) em bovinos.
Foram analisados os parâmetros de Limite
de detecção (LD), Sensibilidade em matriz,
Repetibilidade, Robustez, Reprodutibilidade e
Especificidade analítica. Os resultados obtidos
foram avaliados estatisticamente através
da Análise de Variância - ANOVA em que a
determinação das variâncias dos erros foi
utilizada para a verificação da aceitabilidade
do sistema de medidas. A aplicabilidade do
método diferencial de q-PCR foi demonstrada
através da análise de amostras clínicas. O
método validado apresentou adequação para
seus respectivos propósitos de uso.
DESENVOLVIMENTO, PADRONIZAÇÃO E VALIDAÇÃO DE MÉTODO DE PCR EM TEMPO REAL PARA O DIAGNÓSTICO ESPECÍFICO DE PSEUDOCOWPOXVIRUS - PCPV EM BOVINOS
-
DOI: 10.22533/at.ed.72719111115
-
Palavras-chave: Pseudocowpoxvirus; Diagnóstico molecular diferencial; q-PCR; Validação; Bovinos.
-
Keywords: Pseudocowpoxvirus; Differential molecular diagnosis; Q-PCR; Validation; Cattle.
-
Abstract:
Brazil has a strong presence in
the world meat trade, leading the world ranking
as the largest beef exporter and holder of one of
the largest herds in the world. For this reason,
any widespread disease that results in damage
or imposes restrictions on trade in animals and products adversely impacts the entire
national economy. The diseases caused by Parapoxvirus (PPV) are of great importance
in the Brazilian livestock scenario, both for the possibility of generating intense economic
losses and for the high human vulnerability. Considering the numerous cases of infections
caused by PPV in the country and because they present clinical symptoms similar to
those caused by foot-and-mouth disease virus, it is essential to develop well-structured
laboratory diagnoses capable of rapid and specific detection, providing differentiation
of the disease. etiological agent. This work reports the validation procedures of the
real time PCR method for detection of Pseudocowpoxvirus (PCPV) in cattle. The Limit
of Detection (LD), Matrix Sensitivity, Repeatability, Robustness, Reproducibility and
Analytical Specificity parameters were analyzed. The obtained results were statistically
evaluated by Analysis of Variance - ANOVA in which the error variance determination
was used to verify the acceptability of the measurement system. The applicability of
the differential q-PCR method was demonstrated by analysis of clinical samples. The
validated method was suitable for its respective use purposes.
-
Número de páginas: 15
- Giliane de Souza Trindade
- Antônio Augusto Fonseca Júnior
- Érica Eustáquia de Freitas Passos
