DESENVOLVIMENTO E IMPLANTAÇÃO DE METODOLOGIA MOLECULAR BASEADA EM PCR-SSP PARA GENOTIPAGEM DA MUTAÇÃO V617F DE JAK2
A proteína JAK2 participa do crescimento e da proliferação celular e as mutações no gene JAK2 podem resultar em aumento do número de células sanguíneas e no desenvolvimento de neoplasias mieloproliferativas. Desta forma, este estudo teve o objetivo de desenvolver e implantar a técnica de PCR-SSP (Sequence-Specific Primer-Polymerase Chain Reaction) para a detecção da mutação V617F de JAK2. Para tanto, foi realizada uma revisão de literatura sobre metodologias de genotipagem da mutação em questão e os primers foram confeccionados baseados no modelo proposto por Xavier (2009), testados e ajustados às melhores condições de amplificação. A técnica de PCR-SSP foi padronizada e mostrou-se eficaz para a detecção da mutação JAK2V617F. Por ser pouco dispendiosa, este método diminui custos e pode ser implantado inclusive em laboratórios de biologia molecular de pequeno porte, auxiliando o diagnóstico de pacientes com doenças mieloproliferativas e favorecendo as pesquisas relacionadas a este gene.
DESENVOLVIMENTO E IMPLANTAÇÃO DE METODOLOGIA MOLECULAR BASEADA EM PCR-SSP PARA GENOTIPAGEM DA MUTAÇÃO V617F DE JAK2
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DOI: 10.22533/at.ed.1592126054
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Palavras-chave: Técnicas de genotipagem, Doenças Mieloproliferativas-Mielodisplásicas, Janus Quinase 2.
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Keywords: Genotyping techniques, Myelodysplatic-Myeloproliferative Diseases, Janus Kinase 2.
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Abstract:
The JAK2 protein promotes cells growth and proliferation, and mutations in the JAK2 gene can result in increase of the number of blood cells and in development of myeloproliferative neoplasms. This study aimed to develop and implement the PCR-SSP (Sequence-Specific Primer-Polymerase Chain Reaction) to detect the JAK2V617F mutation. Therefore, a literature review about genotyping methodologies for this mutation was conducted and primers were based on the model proposed by Xavier (2009), tested and adjusted to the best amplification condition. The PCR-SSP technique was standardized and was effective for the detection of the JAK2V617F mutation. As it is not expensive, the technique reduces costs and can be implanted even in small molecular biology laboratories, helping the diagnosis of patients with myeloproliferative diseases and favoring research related to this gene.
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Número de páginas: 10
- Cristiane Maria Colli
- Evelyn Castillo Lima Vendramini
- Jeane Eliete Laguila Visentainer
- Quirino Alves de Lima Neto
- Ana Maria Sell
- Ariane Laguila Altoé
