COMO ISOLAR PROTEÍNAS APOPLÁSTICAS: UMA ESTRATÉGIA DE PESQUISA DA INTERAÇÃO PLANTA-PATÓGENO
O apoplasto é um compartimento vegetal que compreende os espaços intercelulares e a parede celular. Este espaço possui grande importância para a planta desde a defesa contra estresses bióticos e abióticos a transporte de hormônios e água. O fluido apoplástico (FA), o líquido do apoplasto, possui substâncias essenciais para o desenvolvimento do vegetal. A obtenção do FA é desafiadora, porém sua investigação poderá ajudar a compreender as respostas de defesas da planta e por outro lado, as respostas do patógeno em sobrepor estas defesas na interação planta-patógeno. Para tanto, faz-se necessário o uso de protocolos específicos que evitem acúmulo de contaminantes e favoreça rendimentos consideráveis para seu estudo. Sendo assim, neste capítulo descrevemos uma metodologia para obtenção de FA de folhas de cacau livre de contaminação citoplasmática por meio de infiltração a vácuo seguida de centrifugação e, extração de proteínas a partir do FA, por meio de SDS-denso e fenol.
COMO ISOLAR PROTEÍNAS APOPLÁSTICAS: UMA ESTRATÉGIA DE PESQUISA DA INTERAÇÃO PLANTA-PATÓGENO
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DOI: 10.22533/at.ed.25720160111
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Palavras-chave: Folha, proteômica, cacau, espaço intercelular
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Keywords: Leaf, proteomics, cocoa, intercellular space
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Abstract:
The apoplast is a vegetal compartment that comprises the intercellular spaces and the cell wall. This space is of great importance to the plant from defense against biotic and abiotic stresses to transport of hormones and water. Apoplastic fluid (FA) has essential substances for plant development. Obtaining FA is challenging, but your research may help to understand plant defense responses and pathogen responses to override these defenses in plant-pathogen interaction. Therefore, it is necessary to use specific protocols that avoid contaminant accumulation and favour considerable yields for its study. Thus, in this chapter we describe a methodology for obtaining FA from cocoa leaves without cytoplasmic contamination by vacuum infiltration followed by centrifugation and protein extraction from FA by dense SDS-phenol.
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Número de páginas: 26
- Carlos Priminho Pirovani
- Karina Peres Gramacho
- Juliano Oliveira Santana
- Ivina Barbosa de Oliveira
