Caracterização de precursoras neuronais derivadas de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo
As células-tronco mesenquimais têm sido o foco de diversos estudos na atualidade, pois podem ser isoladas a partir de qualquer tecido vascularizado e são capazes de se diferenciar em linhagens mesodermais e não mesodermais. O tecido adiposo é considerado uma boa fonte para obtenção dessas células, pois apresenta um alto rendimento no isolamento e uma maior capacidade de formar colônias. Com relação à sua capacidade de diferenciação, as células-tronco mesenquimais do tecido adiposo podem se diferenciar em diversas linhagens in vitro como, adipogênica, condrogênica, osteogênica e neurogênica. Durante a diferenciação neurogênica ocorre a formação de neuroesferas, que são compostas por precursoras neuronais, as quais são uma alternativa no tratamento de doenças neurodegenerativas como o Alzheimer e o Parkinson. Contudo, para a utilização segura e eficaz dessas células na medicina regenerativa é necessária uma caracterização imunofenotípica e genotípica. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi caracterizar as precursoras neuronais derivadas das células-tronco mesenquimais do tecido adiposo. Para isso, foram isoladas células do tecido adiposo que foram cultivadas, expandidas e, em seguida, submetidas à diferenciação trilineage. A caracterização das células indiferenciadas foi realizada por meio da citometria de fluxo que indicou que as células isoladas apresentaram características de células-tronco mesenquimais. A diferenciação em precursoras neuronais se deu por meio da formação de neuroesferas após a semeadura das células sobre uma matriz de biopolímero natural, denominada NFBX. As células submetidas à diferenciação foram positivas para expressão das proteínas Nestina e ß tubulina-III na imunocitoquímica e, também, expressaram os genes NEFM e TUBB3 na RT-PCR, indicando a característica neuronal das células diferenciadas.
Caracterização de precursoras neuronais derivadas de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo
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DOI: 10.22533/at.ed.6862108098
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Palavras-chave: células-tronco mesenquimais, tecido adiposo, neuroesferas, precursoras neuronais, biopolímero.
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Keywords: mesenchymal stem cells, adipose tissue, neurospheres, neural precursor, biopolymer.
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Abstract:
Mesenchymal stem cells have been the focus of several studies, as they can be isolated from any vascularized tissue and can differentiate into mesodermal and non-mesodermal lineages. Adipose tissue is considered a good source for these cells, as it has a high yield in isolation and a greater capacity to form colonies. Regarding their differentiation capacity, mesenchymal stem cells from adipose tissue can differentiate into several in vitro lineages, such as adipogenic, chondrogenic, osteogenic, and neurogenic. During neurogenic differentiation, neurospheres, composed of neural precursors, are formed. These cells can be an alternative in the treatment of neurodegenerative diseases such as Alzheimer and Parkinson. However, for the safe and effective use of these cells in regenerative medicine, immunophenotypic and genotypic characterization is necessary. Therefore, this study aimed to characterize neural precursors derived from adipose tissue mesenchymal stem cells. For that, cells from the adipose tissue were isolated and cultured, expanded, and submitted to trilineage differentiation. The characterization of undifferentiated cells was carried out through flow cytometry which indicated that the isolated cells had characteristics of mesenchymal stem cells. The differentiation in neural precursors occurred through the formation of neurospheres after sowing the cells over a natural biopolymer matrix, called NFBX. The cells submitted to differentiation were positive for the expression of nestin and ?III-tubulin proteins in immunocytochemistry and also expressed the NEFM and TUBB3 genes in RT-PCR, indicating the neural characteristic of the differentiated cells.
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Número de páginas: 15
- Ana Carolina Irioda
- Priscila Elias Ferreira Stricker
- Bassam Felipe Mogharbel
- Nádia Nascimento da Rosa
- Katherine Athayde Teixeira de Carvalho
- Nathalia Barth de Oliveira