BIORREPOSITÓRIO DE SALIVA EM ESTUDOS GENÉTICO-MOLECULARES: AVALIAÇÃO DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE EXTRAÇÃO DE DNA APÓS LONGOS PERÍODOS DE ARMAZENAMENTO
No campo das análises genéticas
e moleculares é de fundamental importância
o uso de materiais biológicos eficazes no que
tange a qualidade dos resultados. No caso do
DNA, dentre os materiais biológicos nos quais
é possível isolá-lo para estudos, o sangue é,
até então, o mais utilizado, porém sua coleta é
invasiva e necessita de pessoal especializado
para o procedimento. Nesse contexto, a
saliva vem ganhando reconhecimento como
uma fonte alternativa para o isolamento de
DNA, pois além do método de coleta não ser
invasivo, sendo tolerado pela maioria dos
indivíduos, apresenta também menor o risco de
contaminação. As amostras de saliva, diferente
do sangue, podem ser congeladas por longos
períodos, possibilitando a implementação de
biorrepositório com a finalidade de pesquisa
na área de genética. Portanto, o intuito deste
estudo foi analisar a qualidade e quantidade de
DNA extraído a partir de amostras de saliva total
armazenada por congelamento pelo período
de 2 e 6 anos, utilizando dois protocolos de
extração. Após a extração, o DNA genômico
foi submetido à análise espectrofotométrica
e genotipagem do polimorfismo rs12532, do
gene MSX1, a fim de, verificar a influência
do congelamento das amostras de saliva a
-20°C e do protocolo de extração utilizado nos
experimentos de genotipagem por PCR Real
Time.
Os resultados encontrados possibilitam inferir
que a concentração e qualidade do DNA
analisado foram viáveis para estudos de
genotipagem.
BIORREPOSITÓRIO DE SALIVA EM ESTUDOS GENÉTICO-MOLECULARES: AVALIAÇÃO DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE EXTRAÇÃO DE DNA APÓS LONGOS PERÍODOS DE ARMAZENAMENTO
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DOI: .
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Palavras-chave: Biorrepositório, Saliva, DNA e PCR.
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Keywords: Biorepository, Saliva, DNA and PCR.
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Abstract:
In the field of genetic and molecular analyzes it is of fundamental
importance the use of biological materials effective in what concerns the quality of the
results. In the case of DNA, among the biological materials in which it is possible to
isolate it for studies, blood is the most used up until now, but its collection is invasive
and requires specialized personnel for the procedure. In this context, saliva has been
gaining recognition as an alternative source for DNA isolation, since besides the
non-invasive collection method, being tolerated by the majority of individuals, it also
presents a lower risk of contamination. Samples of saliva, other than blood, can be
frozen for long periods, allowing the implementation of a biorepository for the purpose
of genetic research. Therefore, the purpose of this study was to analyze the quality and
quantity of DNA extracted from samples of total saliva stored by freezing for the period
of 2 and 6 years using two extraction protocols. After extraction, the genomic DNA was
subjected to spectrophotometric analysis and genotyping of the rs12532 polymorphism
of the MSX1 gene in order to verify the influence of the freezing of the saliva samples
at -20 ° C and the extraction protocol used in the genotyping experiments by Real Time
PCR. The results obtained allow us to infer that the concentration and quality of the
analyzed DNA were feasible for genotyping studies.
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Número de páginas: 15
- Thais Francini Garbieri
- Thiago José Dionísio
- Carlos Ferreira dos Santos
- Lucimara Teixeira das Neves
- Natália Ramos
