AVALIAÇÃO DA SECREÇÃO CUTÂNEA DE LARVAS NECRÓFAGAS Chrysomya albiceps (DIPTERA, CALLIPHORIDAE) INIBIDORAS DE BIOFILME DE Klebsiella pneumoniae KPC
A entomologia forense consiste
no método de utilizar dípteras como a mosca
Chrysomya albiceps (Diptera: Calliphoridae),
uma vez que são as primeiras a chegar ao local
e colonizar o corpo. Em ambientes hospitalares
as bactérias como Klebsiella pneumoniae vem
adquirindo resistência formando biofilmes,
deixando antibióticos carbapênicos sem ação
sobre elas. Com isso o objetivo desse trabalho
é a caracterização de moléculas bioativas
encontrada na secreção de larvas, com efeito
inibitório no desenvolvimento de biofilme de
K. pneumoniae (KPC 1825971). As amostras
coletadas foram lavadas duas vezes com
água ultrapura, pesadas e centrifugadas. Após
o sobrenadante foi filtrado em membrana
poliestersulfônica e liofilizados. A concentração
de proteínas presentes na amostra foi quantificada
pelo método de Bradford. A amostra foi aplicada
em gel de eletroforese SDS-PAGE 12%. O
teste bacteriano foi realizado pelo método de
microdiluição em placas de 12 poços, com meio
de cultura Mueller Hinton, ressuspendendo 4 mg
de cada amostra no meio líquido bacteriano, e
o teste de biofilme foi feito com diluição seriada
das amostras. Os resultados do perfil proteico
mostram a presença de peptídeos como massas
moleculares similares as descritas na literatura
para compostos encontrados na secreção da
família Calliphoridae. Por exemplo, diptericinas
de 8 e 9 kDa, cecropinas e defensinas com 4
e 5 kDa, respectivamente. Contra Klebsiella
pneumoniae KPC houve inibição do biofilme de
82%. O estudo é de grande importância pois
pode ser possível produção de novos fármacos
através dessas proteínas.
AVALIAÇÃO DA SECREÇÃO CUTÂNEA DE LARVAS NECRÓFAGAS Chrysomya albiceps (DIPTERA, CALLIPHORIDAE) INIBIDORAS DE BIOFILME DE Klebsiella pneumoniae KPC
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DOI: 10.22533/at.ed.7541902093
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Palavras-chave: Entomologia Forense, resistência, moléculas.
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Keywords: Forensic Entomology, resistance, molecules.
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Abstract:
Forensic entomology consists of the method of using diptera such as
the fly Chrysomya albiceps (Diptera: Calliphoridae), since they are the first to arrive at
the site and colonize the body. In hospital environments, bacteria such as Klebsiella
pneumoniae have acquired resistance-forming biofilms, leaving carbapenic antibiotics
with no action on them. Thus, the objective of this work is the characterization of bioactive
molecules found in larval secretion, with an inhibitory effect on the development of
K. pneumoniae biofilm (KPC 1825971). The collected samples were washed twice
with ultrapure water, weighed and centrifuged. After the supernatant was filtered on
polyether sulfonic membrane and lyophilized. The concentration of proteins present in
the sample was quantified by the Bradford method. The sample was applied on a 12%
SDS-PAGE electrophoresis gel. The bacterial test was performed by the microdilution
method in 12-well plates with Mueller Hinton culture medium, resuspending 4 mg of
each sample in the bacterial liquid medium, and the biofilm test was done with serial
dilution of the samples. The protein profile results showed the presence of peptides
with similar molecular mass observed in the literature for the Calliphoridae family
secretion compound. For example, 8 and 9 kDa diptericins, 4 and 5 kDa cecropins and
defensins, respectively. The study is of great importance because it may be possible to
produce new drugs through these proteins.
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Número de páginas: 15
- Patrícia Souza e Silva
- Regina Meneses Gonçalves
- Daniela Lopes Da Cunha
- Lucas Rodrigues de Lima
- Carina Elisei De Oliveira
- Ludovico Migliolo
