ANTICORPO MONOCLONAL A GP43 E ANÁLISE DE REATIVIDADE COM ANTÍGENOS DE Paracoccidioides brasiliensis E DE P. lutzii NA PARACOCCIDIOIDOMICOSE HUMANA
A paracoccidioidomicose (PCM) é uma doença sistêmica causada pelo fungo Paracoccidioides brasiliensis e pela nova espécie, P. lutzii, ainda pouco investigado. Objetivou-se obter IgG monoclonal anti-gp43 de P. brasiliensis e analisar sua reatividade com os antígenos de P. brasiliensis e de P. lutzii. Inicialmente foi obtida IgG anti-gp43 (mAbgp43) por expansão de hibridoma produtor de anticorpos monoclonais a gp43 e cromatografia de afinidade (proteína G). A reatividade de mAbgp43 foi analisada por dot blotting utilizando antígenos totais de P. brasiliensis (B339) e de P. lutzii (LDR2), como também uma amostra de escarro de paciente com PCM. Foi determinado nível de gp43 em amostras de urinas de pacientes com PCM por ensaio imunoenzimático de inibição (inhELISA) utilizando mAbgp43. O dot blotting demonstrou reatividade intensa de mAbgp43 com antígenos de P. brasiliensis, mas não com os de P. lutzii. A amostra de escarro mostrou-se positiva. O inhELISA demonstrou um nível elevado de gp43 em urinas de pacientes com PCM em relação ao controle saudável (p<0.05). Conclui-se que mAbgp43 interage fortemente com os antígenos de P. brasiliensis e não com os de P. lutzii e que existe potencial de se utilizar mAbgp43 para detecção/quantificação de gp43 em amostras de biológicas (tais como escarros e urinas). Todavia existe a necessidade de estudos adicionais para infecções causadas pelo fungo P. lutzii.
ANTICORPO MONOCLONAL A GP43 E ANÁLISE DE REATIVIDADE COM ANTÍGENOS DE Paracoccidioides brasiliensis E DE P. lutzii NA PARACOCCIDIOIDOMICOSE HUMANA
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DOI: 10.22533/at.ed.7222222061
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Palavras-chave: Antígenos, Imunodiagnóstico, ELISA de inibição, Micose.
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Keywords: Antigens, Ammunodiagnosis, Inhibition ELISA, Mycosis.
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Abstract:
Paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic disease caused by the fungus Paracoccidioides brasiliensis and by the new species, P. lutzii, still little investigated. The objective was to obtain anti-gp43 monoclonal IgG from P. brasiliensis and analyze its reactivity with P. brasiliensis and P. lutzii antigens. Initially, IgG anti-gp43 (mAbgp43) was obtained by expanding a hybridoma producing monoclonal antibodies to gp43 and by affinity chromatography (protein G). The reactivity of mAbgp43 was analyzed by dot blotting using total P. brasiliensis (B339) and P. lutzii (LDR2) antigens, as well as a sputum sample from a patient with PCM. The gp43 level was determined in urine samples from PCM patients by inhibition enzyme-linked immunosorbent assay (inhELISA) by using mAbgp43. Dot blotting showed intense reactivity of mAbgp43 with P. brasiliensis antigens, but not with P. lutzii antigens. The sputum sample was positive. inhELISA demonstrated an elevated level of gp43 in urines of PCM patients compared to healthy control (p<0.05). It is concluded that mAbgp43 strongly interacts with P. brasiliensis antigens and not with those of P. lutzii and that there is potential to use mAbgp43 for detection/quantitation of gp43 in biological samples (such as sputum and urine). However, there is a need for additional studies for infections caused by the fungus P. lutzii.
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Número de páginas: 7
- Franciele Ayumi Semêncio Chiyoda-Rodini
- Tawane Dancini Arduan
- Cassia Reika Takabayashi Yamashita
- João Paulo Assolini
- Adriane Lenhard-Vidal
- Flávio Hiroshi Itano
- Maria Catarina Cavalcanti Fracazzo
- Eiko Nakagawa Itano
- Mario Augusto Ono
- Bianca Dorana de Oliveira Souza
