ACTIVIDAD INHIBITORIA DE VACCINIUM MACROCARPON SOBRE LA FASE PLANCTÓNICA Y BIOPELICULAR DE ESCHERICHIACOLI CJ-10
La causa más común de infección del tracto urinario es Escherichia coli, un patógeno gram negativo ubicuo y miembro de la familia Enterobacteriaceae. Por esta razón, se hace necesario explorar alternativas fitoquímicas que permitan controlar el crecimiento de esta bacteria. Este trabajo tiene como objetivo determinar el efecto de Vaccinium macrocarpon sobre la fase planctónica y biopelicular de Escherichia coli CJ-10. Se preparó una solución stock de V. macrocarpon con polvo del fruto (CP; Atoka Cranberries, Canadá) a una concentración de 100 mg/mL en agua destilada. Un cultivo de 24 h de E. coli CJ-10 ajustado a 1x109 UFC mL-1 fue diluido (1/10) en CN, y se agregaron 0,6mL a 20 tubos de ensayo que contenían 2,4mL de CN. Posteriormente, se agregaron 3mL de solución stock de V. macrocarpon. A los tubos control se les agregó 3mL de CN. Se incubó (48h, 37ºC) y la fase planctónica fue retirada para lectura a 540nm. Los tubos se lavaron 3 veces con agua desionizada y las células adheridas se fijaron con metanol (15min). Los tubos fueron vaciados y secados al aire. Se agregaron 7mL de solución de cristal violeta al 1% (p/v) a cada tubo. El exceso de colorante fue removido. Los tubos se lavaron 3 veces con agua destilada estéril. Se agregaron 8mL de etanol al 70% (v/v) para solubilizar el colorante adherido y se midió su DO a 595nm. Los resultados muestran que en los controles la fase planctónica tiene una DOprom = 0,35 y la fase biopelicular una DOprom = 0,49, mientras que en las preparaciones con V. macrocarpon las DOprom son de 0,24 y 0,15 respectivamente, evidenciando así el efecto antibiopelícula. Se concluye que V. macrocarpon tiene efecto inhibitorio tanto sobre la fase planctónica como sobre la fase biopelicular de E. coli CJ-10.
ACTIVIDAD INHIBITORIA DE VACCINIUM MACROCARPON SOBRE LA FASE PLANCTÓNICA Y BIOPELICULAR DE ESCHERICHIACOLI CJ-10
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DOI: 10.22533/at.ed.42822240511
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Palavras-chave: Vacciniummacrocarpon, Fase planctónica Escherichiacoli CJ-10, biopelicula.
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Keywords: Vacciniummacrocarpon, planktonic phase, Escherichiacoli CJ-10, biofilm.
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Abstract:
The most common cause of urinary tract infection is Escherichia coli, a ubiquitous gram-negative pathogen and a member of the Enterobacteriaceae family. For this reason, it is necessary to explore phytochemical alternatives that allow controlling the growth of this bacterium. This work aims to determine the effect of Vaccinium macrocarpon on the planktonic and biofilm phase of Escherichia coli CJ-10. A stock solution of V. macrocarpon with fruit powder (CP; Atoka Cranberries, Canada) was prepared at a concentration of 100 mg/mL in distilled water. A 24-h culture of E. coli CJ-10 adjusted to 1x109 CFU/mL was diluted (1/10) in NB, and 0,6 mL was added to 20 test tubes containing 2,4 mL of NB. Subsequently, 3 mL of V. macrocarpon stock solution were added. 3 mL of NB was added to the control tubes. It was incubated (48h, 37ºC) and the planktonic phase was removed for reading at 540 nm. The tubes were washed 3 times with deionized water and the attached cells were fixed with methanol (15 min). The tubes were emptied and air dried. 7mL of 1% (w/v) crystal violet solution was added to each tube. Excess dye was removed. The tubes were washed 3 times with sterile distilled water. 8 mL of 70% (v/v) ethanol were added to solubilize the adhering dye and its OD at 595 nm was measured. The results show that in the controls the planktonic phase has a OD prom = 0,35 and the biofilm phase a OD prom = 0,49, while in the preparations with V. macrocarpon the OD prom are 0,24 and 0,15, respectively, thus evidencing the antibiofilm effect. It is concluded that V. macrocarpon has an inhibitory effect on both the planktonic phase and the biofilm phase of E. coli CJ-10.
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Número de páginas: 11
- Maria Parra
- Adriana Valero
- Marxel Bastidas
- Carlos Sierra
- Laura Antequera
- Francelys Fernandez
- Angel Parra
- Maria Alvarado
- Carla Lossada
- Anselmo Ledesma
- Aleivi Perez
- Lenin Gonzalez
- Adalberto Villegas
