ACTIVIDAD ANTIVIRAL DE EXTRACTOS DE ALGAS DE LA COSTA PERUANA: CHONDRACANTHUS CHAMISSOI Y CHLORELLA PERUVIANA CONTRA VIRUS DENGUE - 2 POR REDUCCIÓN DE PLACAS EN CÉLULAS VERO-76
El Dengue es la enfermedad viral más importante transmitida por mosquitos, imponiendo en la actualidad una enorme carga sanitaria y económica en todo el mundo. Actualmente no existe un tratamiento para combatir la infección por dengue, y es necesario desarrollar nuevas alternativas para la prevención y el tratamiento de esta enfermedad. Extractos de Chondracanthus chamissoi y Chlorella peruviana han demostrado tener propiedades antivirales contra diversos virus debido a su composición macromolecular, que incluyen polisacáridos, clorofila, acetogeninas, ácidos grasos, vitaminas, xantofilas, aminoácidos y compuestos halogenados, entre otros. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antiviral de extractos de Chondracanthus chamissoi y Chlorella peruviana contra DENV- 2 en células Vero -76 como sustrato. Se utilizaron los siguientes extractos: carragenano de Chondracanthus chamissoi extraída con isopropanol, carragenano de Chondracanthus chamissoi en fase de esporofito (20 mg/ml), carragenano de Chondracanthus chamissoi en fase de gametofito (20 mg/ml), carragenano en PBS (10 mg/ml) ml), carbohidratos de Chondracanthus chamissoi en fase de esporofito (1,35 μg/ml), carbohidratos de Chondracanthus chamissoi en fase de gametofito (825 μg/ml), carbohidratos de Chondracanthus chamissoi en fase de esporofito (825 μg/ml), carbohidratos de Chlorella peruviana (4 μg/ml) y extracto crudo de Chlorella peruviana . La prueba de citotoxicidad se realizó inoculando diluciones 1:5 y 1:10 de cada extracto en placas de 24 pocillos con monocapa completa de células Vero-76 y evaluando los cambios morfológicos en la monocapa celular durante 9 días. Posteriormente, la prueba de actividad antiviral se realizó mediante una Prueba de Reducción de Número de Placas contra una cepa de tipo salvaje de DENV-2 usando células Vero-76 en suspensión y método semisólido. Los extractos de algas y los controles de carragenano se evaluaron a diluciones 1:5 y 1:10. Como resultado, los extractos de Chondracanthus chamissoi y el extracto de carbohidratos de Chlorella peruviana no mostraron citotoxicidad. El extracto crudo de Chlorella peruviana mostró citotoxicidad a diluciones 1:5 y 1:10. Los extractos de Chondracanthus chamissoi mostraron un porcentaje de reducción superior al 70% contra DENV-2 en las siguientes concentraciones: carragenano de Chondracanthus chamissoi extraída con isopropanol a diluciones 1:5 y 1:10, carragenano de Chondracanthus chamissoi en fase de esporofito a 4 mg/ml, Chondracanthus chamissoi carragenano en fase de gametofito a 2 mg/ml, carragenano en PBS a 1 mg/ml, carbohidratos de Chondracanthus chamissoi en fase de esporofito a 0,135 μg/ml, carbohidratos de Chondracanthus chamissoi en fase de gametofito a 0,825 μg/ml, fase de carbohidratos de Chondracanthus chamissoi en carbohidratos 0,825 μg/ml. Por otro lado, el extracto de carbohidratos de Chlorella peruviana tenía actividad antiviral contra DENV-2 a 0,4 μg/ml. En conclusión, los extractos de Chondracanthus chamissoi y Chlorella peruviana analizados en este estudio mostraron actividad antiviral contra DENV-2 en células Vero-76, volviendo necesario continuar con las evaluaciones en modelos animales para corroborar la actividad antiviral de estos extractos.
ACTIVIDAD ANTIVIRAL DE EXTRACTOS DE ALGAS DE LA COSTA PERUANA: CHONDRACANTHUS CHAMISSOI Y CHLORELLA PERUVIANA CONTRA VIRUS DENGUE - 2 POR REDUCCIÓN DE PLACAS EN CÉLULAS VERO-76
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DOI: 10.22533/at.ed.4782013033
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Palavras-chave: Chondracanthus chamissoi, Chlorella peruviana, DENV-2, Actividad Antiviral, Línea Celular Vero-76
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Keywords: Chondracanthus chamissoi, Chlorella peruviana, DENV-2, Antiviral Activity, Vero-76 Cell Line
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Abstract:
Dengue is the most important viral disease transmitted by mosquitoes, currently imposing a huge health and economic burden worldwide. There is no treatment for dengue, and it is necessary to develop new alternatives for the prevention and treatment of this disease. Chondracanthus chamissoi and Chlorella peruviana could have antiviral properties due to their high content of carrageenans and proteins against dengue virus. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antiviral activity of Chondracanthus chamissoi and Chlorella peruviana extracts against DENV-2 in Vero -76 cells. In this study, the following extracts were used: Chondracanthus chamissoi carrageenan extracted with isopropanol, Chondracanthus chamissoi carrageenan in sporophyte phase (20 mg/ml), Chondracanthus chamissoi carrageenan in gametophyte phase (20 mg/ml), carrageenan in PBS (10 mg/ml), Chondracanthus chamissoi carbohydrates in sporophyte phase (1,35 μg/ml), Chondracanthus chamissoi carbohydrates in gametophyte phase (825 μg/ml), Chondracanthus chamissoi carbohydrates in sporophyte phase (825 μg/ml), Chlorella peruviana carbohydrates (4 μg/ ml) and Chlorella peruviana crude extract. The cytotoxicity test was performed inoculating 1:5 and 1:10 dilutions of each extract in 24-well plates with complete monolayer of Vero-76 cells and evaluating morphological changes on the cellular monolayer during 9 days. Subsequently, the antiviral activity test was performed by plaque reduction neutralization test against a wild type strain of DENV-2 using Vero-76 cells in suspension and semi-solid method. Algae extracts and carrageenan controls were evaluated at 1: 5 and 1:10 dilutions. As results, Chondracanthus chamissoi extracts and Chlorella peruviana carbohydrates extract did not show cytotoxicity. The Chlorella peruviana crude extract showed cytotoxicity at 1: 5 and 1:10 dilutions. Chondracanthus chamissoi extracts showed a reduction percentage greater than 70% against DENV-2 in the following concentrations: Chondracanthus chamissoi carrageenan extracted with isopropanol at 1: 5 and 1:10 dilutions, Chondracanthus chamissoi carrageenan in sporophyte phase at 4 mg/ml, Chondracanthus chamissoi carrageenan in gametophyte phase at 2 mg/ml, carrageenan in PBS at 1 mg/ml, Chondracanthus chamissoi carbohydrates in sporophyte phase at 0,135 μg/ml, Chondracanthus chamissoi carbohydrates in gametophyte phase at 0,825 μg/ml, Chondracanthus chamissoi carbohydrates in sporophyte phase at 0,825 μg/ml. On the other hand, the Chlorella peruviana carbohydrates extract had antiviral activity against DENV-2 at 0, 4 μg/ml. In conclusion, Chondracanthus chamissoi and Chlorella peruviana extracts analyzed in this study showed antiviral activity against DENV-2 in Vero-76 cells. It is necessary to continue with evaluations in animal models to corroborate the antiviral activity of these extracts.
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Número de páginas: 7
- Enrique MAMANI ZAPANA
- Lucas SEVILLA DROZDEK
- Juan SULCA HERENCIA
- Mauro MARIANO ASTOCONDOR
- Haydee MONTOYA TERREROS
- María GONZÁLES ROMERO
- Bernardo QUISPE BRAVO
- Rubén ARANCIBIA GONZÁLES
- Luiz EDISON DURIGON
- Egma Marcelina Mayta Huatuco