O exame citopatológico do colo do útero é uma estratégia essencial para a detecção precoce do câncer cervical. No entanto, fatores como medo, vergonha e desinformação podem dificultar a adesão das mulheres. Nesse contexto, o acolhimento e a humanização no atendimento são fundamentais para garantir conforto, confiança e qualidade na assistência prestada. Objetivo: Discutir a importância do acolhimento e da humanização durante a coleta do exame citopatológico, destacando seu impacto na qualidade do cuidado. Métodos: Trata-se de uma revisão da literatura, com abordagem qualitativa, baseada em artigos científicos, manuais do Ministério da Saúde e diretrizes relacionadas à saúde da mulher, selecionados conforme relevância e atualidade. Resultados e Discussão: Evidenciou-se que práticas humanizadas, como escuta qualificada, comunicação clara, respeito à privacidade e individualidade, além de ambiente acolhedor, contribuem significativamente para a redução da ansiedade e do constrangimento durante o exame. O vínculo estabelecido entre profissional e usuária favorece maior adesão à realização periódica do exame e ao seguimento adequado. A atuação da equipe de saúde, especialmente na Atenção Primária, é crucial para promover educação em saúde, desmistificar o procedimento e garantir cuidado integral. Considerações Finais: Conclui-se que o acolhimento e a humanização são elementos indispensáveis na coleta do exame citopatológico, influenciando diretamente na qualidade da assistência e na adesão das mulheres. Investir em práticas humanizadas fortalece o cuidado centrado na pessoa e contribui para a prevenção efetiva do câncer do colo do útero.